自噬参与Aβ介导的RPE细胞炎症的作用及机制研究

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目的:年龄相关的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞功能障碍,与多种视网膜疾病如年龄相关性黄斑变性的发病有关。研究表明,自噬可能与衰老的RPE细胞的炎症反应有密切关联,但是自噬在RPE细胞老龄化的具体作用不明。沉默信号调节蛋白6(Sirtuin 6,SIRT6)是一个调节衰老的重要蛋白,在心肌等组织中参与自噬和炎症调节。β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)是年龄相关性黄斑变性的病理沉积物玻璃膜疣的主要成分,在RPE细胞的炎症反应中起重要作用。本文通过研究SIRT6与自噬及炎症在RPE细胞中的作用,及与Aβ的调节关系,来探究RPE细胞功能及视网膜疾病的可能机制,提供新的治疗思路。方法:免疫荧光检测3周,3个月,7个月和12个月的C57BL/6小鼠RPE细胞中Aβ,自噬分子和SIRT6表达水平。在小鼠玻璃体腔内注射Aβ,检测自噬分子和SIRT6水平。小鼠原代RPE细胞中加入Aβ,q PCR检测炎症因子水平,及自噬和SIRT6变化。检测si RNA-SIRT6敲除和AAV-SIRT6过表达SIRT6基因的ARPE-19细胞后的自噬水平。PCR检测加入3-MA后Aβ对小鼠原代RPE细胞中炎症水平影响。结果:在小鼠眼RPE中,Aβ沉积,自噬分子和SIRT6随年龄升高。Aβ促进RPE中SIRT6和自噬分子表达,SIRT6调控自噬水平。抑制自噬减弱了Aβ介导的炎症反应。结论:SIRT6调控的自噬参与了Aβ介导的RPE细胞的炎症反应。
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