龙胆泻肝方是中医临床应用相当广泛的重要经典方剂之一,至今已有七百多年历史。其方剂由龙胆、黄芩、栀子、柴胡、泽泻、木通、车前子、当归、地黄、炙甘草等十味药组成,有清肝胆、利湿热之功效,用于临床所见的肝胆湿热、头晕目赤、胁痛口苦等症的治疗。该方对急性肝损伤有明显保护作用,能明显促进胆汁分泌,对药源性肝脏中毒具有显著的拮抗作用。除此之外,还有抗炎,抑制毛细血管通透性增高,显著增强小鼠胸腺重量,显著加强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,显著提高淋巴细胞转化率等。但是,传统的汤剂避免不了使用不便、口感差、不易储存、煎制方法落后等缺陷,而丸剂又有崩解性能不好、吸收差等问题的存在。因此,将龙胆泻肝方开发成为现代中药制剂是极其有价值的工作。 现代药物开发关注的三大问题包括安全性,有效性和质量可控性,而质量的可控性又直接影响到药物的安全性和有效性。对于中药制剂,由于原药材本身的质量可控性难以解决,成为中药制剂发展的瓶颈。为了加快中药现代制剂的发展,迫切需要为制剂提供一种质量可控的原料；这种原料应该不同于简单的提取物,必须最大限度的保留原方的临床疗效,并且具有对药效物质基础进行有效质量控制的方法。而中药标准提取物的概念正好契合了中药复方制剂开发的需求。所谓中药标准提取物,是指采用现代科学技术,对传统中药材、饮片进行提取加工而得到的一种具有相对明确药效物质基础(化学成分组、药效物质群)、以及严格质量标准的中药制剂的原料药、中间体,甚或最终产品。本课题以龙胆泻肝复方为研究对象,开展了中药标准提取物的制备工艺研究以及质量标准方法建立的研究。 本论文的研究目的主要为考察龙胆泻肝方提取物的制备工艺,建立复方提取物的定性、定量质量标准,保证提取物的质量具有可控性,同时为《中国药典》提取物标准提供参考。按课题设计,主要包含以下四个方面的研究： 一、动物体内吸收与分布特征指导下提取物指标成分的选择； 二、复方标准提取物及主要药材标准提取物制备工艺的研究； 三、复方标准提取物及主要药材标准提取物定量质量标准方法的建立； 四、复方标准提取物定性质量标准方法的建立。 通过动物体内吸收与分布特征指导提取物指标成分的选择,含环烯醚萜类化合物的龙胆、栀子以及地黄药材分别选取龙胆苦苷、京尼平苷以及梓醇作为标准提取物的定量指标成分；确定复方定量指标成分为龙胆苦苷、京尼平苷和黄芩苷。考察了龙胆泻肝方提取和大孔树脂纯化的工艺条件,同时也考察了龙胆、栀子和地黄标准提取物的制备工艺及大孔吸附树脂法制备富含环烯醚萜苷类成分的龙胆、栀子和地黄标准提取物的纯化工艺。利用定量指标成分,建立了龙胆泻肝方提取物及龙胆、栀子和地黄标准提取物的定量分析方法,并进一步制定了定量质量标准。利用HPLC以及TLC指纹图谱,确认了十味单味药材在复方提取物中的特征贡献峰,并进一步制定了全面反映十味药材在全方中贡献的定性质量控制方法。本论文在采用体内吸收与分布特征指导下提取物定量指标成分选择、富含环烯醚萜苷类成分的龙胆、栀子和地黄标准提取物制备工艺研究、龙胆泻肝方提取物的定性、定量质量标准的建立上,均做出了全面的创新性的工作。