发酵性丝孢酵母以木薯淀粉基质发酵单细胞油脂研究

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伴随着全球石油能源的短缺,环境污染问题日益突出,开发可再生、清洁的生物能源成为一种趋势。产油微生物具有原料利用广泛、油脂含量高、菌种资源丰富等特点,可有效发酵生产生物柴油的油脂原料。本论文选用发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans),研究了其以葡萄糖为碳源发酵微生物油脂。首先通过单因素初步优化培养基的组成,接着考察了发酵性丝孢酵母以葡萄糖为碳源在2L发酵罐的分批发酵及补料分批发酵,生物量、油脂含量分别为23.06g/L、68.49%和61.18g/L、45.34%。气相色谱分析表明油脂脂肪酸组成主要含有棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸和亚油酸,其成分与植物油脂非常相似,可作为生物柴油的良好生产原料。为了降低生产成本,选择了木薯淀粉水解液(cassava starch hydrolysate, CSH)替代葡萄糖作为碳源,探索了发酵性丝孢酵母利用CSH发酵产油脂的可行性,系统研究了各相关因素对细胞生长和油脂积累的影响。对影响细胞油脂产量的发酵条件(发酵温度,碳氮比,接种量,pH,摇床转速,无机盐浓度)进行了响应面分析法优化,得出发酵性丝孢酵母以木薯淀粉发酵微生物油脂的最优摇瓶发酵条件为:发酵温度28.78°C、C/N126.18、pH6.69、接种量8%、摇床转速200r/min、无机盐浓度1倍(同发酵培养基),油脂产量理论最大值达到15.01g/L。经模型验证,预测值与验证试验平均值接近,在优化条件下油脂含量提高了28.61%。考察了发酵性丝孢酵母以CSH为碳源在2L发酵罐的分批发酵及补料分批发酵,生物量、油脂含量分别达到26.32g/L、38.87%和78.27g/L、45.29%。气相色谱分析表明油脂脂肪酸组成主要含有棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸和亚油酸,其成分与植物油脂非常相似,可作为生物柴油的良好生产原料。为进一步降低生产成本和提高油脂生产效率,研究了在培养基中添加少量氧载体加强氧传递对发酵性丝孢酵母细胞生长和油脂积累的影响,筛选出1%(v/v)正十二烷为最佳添加量,同时,在摇瓶发酵基础上于2L发酵罐中进行了补料分批发酵初步研究。在应用氧载体的补料分批2L发酵罐中,生物量、油脂含量都有大幅度提高,分别达到102g/L、50.85%。气相色谱分析表明油脂脂肪酸组成主要含有棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸和亚油酸,其成分与植物油脂非常相似,可作为生物柴油的良好生产原料。研究对于降低微生物油脂的生产成本具有重要意义,有助于解决限制生物柴油大规模生产和广泛应用的油脂原料瓶颈及动力成本问题。
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