准噶尔乌头的生药学、化学和急毒研究

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目的:对民间药材准噶尔乌头,通过生药学方法完善其性状、显微粉末特征;分析其中所含有的生物碱成分;同时考察准噶尔乌头对实验小鼠急性毒性的发生情况,观察服用此药材后的中毒表现,并测定其脏器系数、半数致死量(LD50),为该药材品质分析、质量控制,以及开发创新药物提供基础数据。方法:采用性状鉴别、组织横切面及粉末显微鉴定等方法初步阐明准噶尔乌头特征;采用HPLC和TLC方法对准噶尔乌头中的生物碱成分进行探讨,建立测定其中各生物碱含量的HPLC方法;对实验小鼠灌服不同浓度的准噶尔乌头原药材粉末混悬液,观察并记录小鼠的活动状态和中毒反应,同时使用改进寇氏法计算LD50。结果:准噶尔乌头块根呈纺锤形,外皮黑褐色且2~4枚形成水平链,萼片呈蓝色,粉末中导管较大,石细胞为类长方形,淀粉粒呈类圆形,一端有特殊的凹陷结构。准噶尔乌头中主要含有12-表-欧乌碱、尼奥灵、准噶尔碱、欧乌碱和宋果灵,其中准噶尔碱和欧乌碱为首次在该植物中发现;HPLC同时检测几种生物碱方法中色谱条件为Inertsil NH2柱(150×4.6mm,5μm)、检测波长270nm、流速1.0ml/min、进样量10μL、柱温30℃、流动相正己烷和无水乙醇(92:8)。该药材给药后30min小鼠均出现活动减少、大汗淋漓、震颤、张口呼吸的中毒症状,死亡高峰在2h内,此药材原粉在24h内的LD50为171mg/kg,其95%可信区为150~195mg/kg,而其在14d内的LD50为155mg/kg,其95%可信区为137~175mg/kg,与空白组比较发现,小鼠染毒后,肝、心、脾、肺、肾的脏器系数与空白组的差值分别在0.63%、0.09%、0.07%、0.16%、0.09%内。结论:以上性状和显微粉末特征可以作为此药材鉴别的根据;所建立的HPLC方法可以作为多个生物碱的定量分析手段;川乌和草乌的LD50分别为1.61g/kg和4.03g/kg,可见准噶尔乌头的毒性远大于以上2者,临床应用时必须根据毒性表现和数据严格控制药材使用量,或对药材进行炮制以达到减毒增效的目的,至于毒性发生机理还有待进一步研究。
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