一 研究背景 1．细胞外基质及其功能 细胞外基质（ECM）是存在于细胞之间的动态网状结构，由胶原、糖蛋白及蛋白聚糖等大分子组成。这些大分子物质可与细胞表面上的特异性受体结合，通过受体与细胞骨架结构直接发生联系或触发细胞内的一系列信号传导而引起不同的基因表达，从而导致细胞的生长和分化，并与许多生理和病理过程相关，包括胚胎发生，胚泡的种植，血管的发生，组织的修复与重建以及肿瘤的侵袭和转移等。基底膜降解的关键步骤是降解相互交联的胶原和弹力纤维。 2．基质金属蛋白酶及其组织抑制物在ECM降解和修复中的作用及其与肿瘤的关系 基质金属蛋白酶具有以下一些共同特点：（1）它们能降解至少一种基底膜成分；（2）都含有锌离子；（3）均以潜酶形式分泌，需被激活后才能发挥蛋白酶的水解活性；（4）活性能被特异性的组织抑制剂所抑制；（5）结构上具同源性，有部分共同的氨基酸序列。MMPs在转录水平受到生长因子、激素、细胞素等的精确调控，在蛋白水平受到其抑制物的调节。迄今为止，MMPs家族已被发现的成员依据其结构和底物的不同可分为五大类，包括胶原酶，明胶酶，基质水解酶，弹性蛋白酶和膜型金属蛋白酶。所有基质金属蛋白酶均要被激活后，才有蛋白水解的功能。有些MMPs的激活机制已比较明确，如MMP-1、9能被丝氨酸激活，也可以被其他的MMPs所激活。与其他的MMPs不同，MMP-2的激活发生在细胞的表面，提示这个特殊的基质金属蛋白酶在肿瘤细胞的生长、侵袭中有着非同寻常的作用，因为在肿瘤细胞侵袭的过程中必须首先破坏基膜（将上皮细胞、内皮细胞等与下层的基质分开的结构），也就是从肿瘤细胞的表面开始。随着MMPs家族的新成员膜型MMPs的新近被发现，有关MMP-2的激活机制已被基本阐明。MT-MMP处于跨膜区，在MMP-2的激活中有着特殊的作用。研究发现MMP-2酶原激活依赖于TIMP-2和MT1-MMP结合始动的复合体的形式。MMP-2的表达与许多上皮来源的肿瘤关系 柯二军医大学 颀上论文 密切，如乳癌，卵巢癌，胃癌及结没肠癌等，井0与肿瘤的恶性程度和侵袭性相关。 但也方不同的报道，认为与肿撤的恶性程度和侵傻性仟关足TIMP．2而非MMP．2 的过度表达。MMP－2活性调宵的欠键是 TIMP－2对其酶活性的抑制，T！MP．2能特 斤性的结合MMP－Zatj原。TIMP－1的抑制阶较厂，能抑制儿乎所有的基质胶原啊及 MMP．9等。 －：研究日的 I．用免疫组化方法检测人类结白肠癌。户MMP．2、MTI．MMP、nMP．1 及 TIMP．2的表达。 2．研究 MMP－2、MT．MMP、TIMP－l 及UMP－2之间的川 f关系，以及它 们的表达与结直肠癌的临床及病理分期的联系。 ＿：实验方法 IHE染色对60例结直肠癌标本进行组织学检查。 二 用兔抗人 MTI．MMP、羊抗人 MMP－2、TIMP－互 及 T［MP．2多克隆抗体通 过免疫组化方法，分别检测上述标本中 MMP工、MT IMMP、TIMP＊ 及 TIMP．2的表达。 四研究结果 1．将60例结直肠癌患者进行Dukes’分期，其中Dukes人期4例；Dukes旧期－22例；D毗CS℃期 29例；D叭CS0期 5例。 2．与正常粘膜相比，肿瘤组织 MT IMMP染色的阳性率和表达强度明显增强。 在肿瘤细胞中，染色主要分布在上皮细胞的胞浆内及胞膜上，肿瘤周围基质 中染色明显较弱。 3 与正常粘膜相比，肿瘤组织MMP．2染色的阳性率和表达强度明显增强。 在肿瘤细胞中，染色主要分布在上皮细胞的胞浆内及胞膜上，肿瘤周围基质 中染色明显较弱，染色强度强弱不等。 4．与正常粘膜相比，肿瘤组织T［MP．l染色的阳性率和表达强度明显增强。 在肿瘤组织中，染色主要分布在肿瘤细胞周围基质中。 5．与正常粘膜相比，肿瘤组织TIMP．2染色的阳性率和表达强度明显增强。 在肿瘤组织中，染色主要分布在肿瘤细胞周围基质中，肿瘤细胞染色明显较 弱，染色强度强弱不等。 3 第二军医大学 硕士论文 一 五研究结论 根据本研究结果，我们认为 MMP－2和 bl’l－MMP与结直肠癌的淋巴结转移和