大鼠主动脉球囊损伤术后Atox1、Lox的表达变化及缬沙坦对其影响

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目的:通过研究血管内皮球囊损伤后铜伴侣蛋白-1(Atox1)、赖氨酸氧化酶(Lox)的表达变化以及缬沙坦对铜伴侣蛋白-1、赖氨酸氧化酶表达影响,探究血管内膜增生过程中铜伴侣蛋白-1及赖氨酸氧化酶的作用以及缬沙坦在抑制血管损伤术后再狭窄中的潜在的机制。方法:采用清洁级,体重量在300-350 g的Wistar大鼠36只,随机分为对照组(n=12)、手术组(n=12)、药物组(n=12),采用大鼠主动脉球囊损伤后再狭窄的动物模型。对照组不给予球囊扩张,自手术前1天开始给予生理盐水灌胃;手术组给予球囊扩张,自手术前1天开始给予生理盐水灌胃;药物组给予球囊扩张,自手术前1天开始给予缬沙坦(20 mg·kg-1·d-1)灌胃。三组大鼠分别于术后第14天、第28天分别取其主动脉,石蜡切块后HE染色,光镜下观察血管形态变化,并用计算机图片分析系统检测主动脉内膜、中膜厚度,采用实时荧光定量PCR检测血管组织中铜伴侣蛋白-1及赖氨酸氧化酶mRNA的表达,免疫组织化学法检测铜伴侣蛋白-1蛋白表达变化,并使用图像分析软件以累计光密度值表示该蛋白的相对含量,采用酶联免疫吸附法检测赖氨酸氧化酶蛋白表达变化。采用SPSS17.0进行数据处理,计量资料结果用x±s表示,采用单因素方差分析进行多组间比较,而组间两两比较用LSD-t,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:(1)球囊损伤术后,手术组主动脉血管内膜及中膜厚度明显增加,与对照组比较,两组间差异有统计学意义(P<0.05);球囊损伤术后,手术组主动脉血管中铜伴侣蛋白-1、赖氨酸氧化酶mRNA及蛋白表达水平明显增加,与对照组比较,两组间差异有统计学意义(P均<0.05)。(2)药物组使用缬沙坦后,主动脉血管内膜、中膜增生减轻,与手术组比较,两组间差异有统计学意义(P<0.05);药物组使用缬沙坦后,主动脉血管中铜伴侣蛋白-1、赖氨酸氧化酶mRNA及蛋白表达水平降低,与手术组比较,两组间差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:(1)大鼠主动脉球囊损伤后内膜增生明显,同时铜伴侣蛋白-1及赖氨酸氧化酶表达增加,证明铜伴侣蛋白-1及赖氨酸氧化酶可能参与血管球囊损伤术后再狭窄过程。(2)使用缬沙坦后内膜增生减轻,同时伴随铜伴侣蛋白-1及赖氨酸氧化酶的表达下降,提示缬沙坦可抑制血管球囊损伤术后再狭窄,且机制可能与抑制铜伴侣蛋白-1及赖氨酸氧化酶有关。
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