本文采用酶交联聚集技术，以戊二醛和乙二醇二缩水甘油醚混合共同作为交联剂，制备了氨基酰化酶（E.C.3.5.1.14）交联聚聚集体，探索了双交联剂体系制备交联聚集体的可行性并优化了反应制备工艺条件。得到如下结果：（1）采用乙醇、丙酮和乙二醇二甲醚三种有机溶剂作为沉淀剂沉降游离态的酶，乙醇的沉淀作用最好。当乙醇用量为90%V/V时，酶蛋白几乎全部被沉淀下来，酶活保留率为82%。丙酮和乙二醇二甲醚随也有着较好的沉淀效果，但在沉淀过程中容易夺取酶分子表面的结合水，从而导致酶活性保留率的下降。（2）氨基酰化酶缺乏表面胺基，无法与戊二醛有效的交联。乙二醇二缩水甘油醚（EGDE）是一种较为新颖的环氧型交联剂，交联机理与戊二醛不同，其环氧基团可以和胺基、巯基、羟基等多种基团反应。通过将戊二醛和乙二醇二缩水甘油醚混合共同作为交联剂使用，提高了氨基酰化酶的交联效率。当酶与戊二醛和乙二醇二缩水甘油醚的质量比为1:0.75:2，在30℃下反应12个小时后，制备生成的氨基酰化酶交联聚集体有63.42%的酶活保留率。（3）采用固定化技术，氨基酰化酶的操作稳定性得到明显提高。大量的酶分子团聚交联在一起，使固定化酶的整体结构比较稳定，热稳定性和耐热耐酸性能方面，固定化酶要明显好于自由酶。由于底物要克服更大的传质阻力才能到达酶颗粒的活性核心，固定化酶最适温度比自由酶高10℃。固定化酶的最适pH为8.0，自由酶为7.0。（4）固定化酶在重复水解5次后还保留着90%的初始酶活性，重复使用10次后，还有72%的活力保留。冻干粉末在4℃下储存一个月，几乎没有酶活力损失，在缓冲溶液中4℃下存放15天后，仍有85%的酶活力保留。（5）自由酶热力学失活曲线符合经典一阶指数衰弱模型，而经过固定化后，酶交联聚集体热力学失活曲线符合经典二阶指数衰弱模型。推测了酶热失活的机理，并从热力学角度解释了固定化酶稳定性提高的原因。