氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，oxLDL）引起的内皮损伤或激活是诱导动脉粥样硬化的关键因素。近年来发现和鉴定的凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1，LOX-1）是唯一表达于大动脉内皮细胞表面的oxLDL受体，它可以结合、中和oxLDL以及对oxLDL的蛋白水解作用。目前大量的体内、外实验证明LOX-1具有广泛的生物学作用，许多学者认为它是动脉粥样硬化发生过程中的一个关键分子，很有可能成为抗动脉粥样硬化药物的靶点。本文在甲醇酵母体系中成功表达了具有类似天然活性的人LOX-1，并建立了适合高通量（high throughput screening，HTS）筛选的LOX-1拮抗剂筛选模型。 以组胺诱导的人白血病单核细胞系THP-1细胞总RNA为模板，应用RT-PCR方法扩增了人LOX-1编码区基因片段，核苷酸序列分析表明扩增片段与GenBank（accession number NM₀02543）报道的序列完全一致。将目的基因片段插入甲醇酵母表达质粒pPIC9K的α-因子信号肽编码序列下游，构建重组表达质粒，将其线性化后，用聚乙二醇（PEG1000）法导入甲醇酵母（Pichia Pastoris GS115）感受态细胞。 利用MD培养基和G418抗性筛选出His⁺Mut⁺转化子。经PCR法鉴定后，采用BMMC培养基对转化子用0.8～1.0％甲醇诱导表达，对诱导4～5天后的发酵夜上清进行SDS-PAGE分析，发现一条特异蛋白条带，大小约43kDa。经Western blot分析证实表达蛋白为重组人LOX-1，受体配体结合试验表明表达的重组蛋白具有结合oxLDL的生物学活性。 将重组人LOX-1用FITC标记后，采用荧光极化法建立了适合于高通量筛选的LOX-1拮抗剂分子筛选模型，该模型以候选化合物与LOX-1的结合强度确定拮抗水平（两者呈正相关）。实验证明该筛选模型重复性强，稳定可靠。已