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诺氟沙星（NOR）是喹诺酮类的一种,广泛的用于动物各种感染性疾病的治疗,然而NOR在禽畜产品的残留严重危害人们的健康。免疫学分析方法是基于抗原抗体的反应,具有操作简单、特异性强、灵敏度高的特点,并且可快速的检测多种样品。因此,本实验将通过制备抗NOR单克隆抗体的免疫学分析方法,检测样品中的NOR的含量。将小分子抗原诺氟沙星NOR通过碳二亚胺法与载体蛋白BSA、OVA进行偶联。得到完全抗原NOR-BSA和NOR-OVA。用NOR-BSA对3只雌性小鼠进行免疫后,利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法和间接竞争ELISA法筛选阳性细胞进行克隆,得到3株稳定分泌抗体的单克隆细胞株,分别命名为7C4,8G3,11G7。检测细胞的上清液和纯化后的腹水效价,分别为1:512,1:1024,1:1024和1:128000,1:128000,1:128000。对三株细胞的亚型鉴定为IgG2b,IgG2b,IgG1。建立的标准竞争曲线计算得IC50值为31.225 ng,其检测线性范围为5.011-630.95 ng/mL,最低检出量为2.75 ng。亲和力常数Kaff为4.6×108。诺氟沙星单克隆抗体与环丙沙星（27.22%）、恩诺沙星（11.29%）、奥比沙星（11.03%）、氧氟沙星（9.73%）、达氟沙星（7.38%）、沙拉沙星（2.57%）、二氟沙星（0.61%）几种抗菌药有较低的交叉反应率。将其中一株单抗7C4制备胶体金试纸条。本实验选择用1.8 mL1%柠檬酸三钠还原100 mL 0.01%氯金酸制备胶体金,经紫外可见光谱520 nm处扫描得知胶体金的粒径为18.41 nm。通过对影响胶体金标记的最佳pH、最佳标记蛋白量进行研究,结果为最佳pH为每毫升胶体金加入5μl的2 mol/L K2CO3,最佳抗体加入量每毫升胶体金中加入6μg浓度为1μg/μl的抗体。当金标抗体稀释3倍时,有最佳显色现象。组装胶体金试纸条的NC膜使用Sarturius CN 95,检测线上用浓度为0.4 mg/mL的诺氟沙星单克隆抗体包被,质控线用0.6 mg/mL的羊抗鼠二抗划线。所制得的胶体金试纸条的灵敏度为30 ng/mL。在牛奶和鱼肉的实际样品检测中,当样品中含有的NOR浓度大于50 ng/mL时可被检出。