有益菌(probiotics)作为生物防治的手段应用于水产养殖体系中,用来改善养殖生态环境并取得了成效。人们在水产养殖中应用有益菌,将其既用作饲料添加剂来调节养殖动物肠道微生态平衡,又用于加入水体起控制养殖池微生物生态区系的作用,此外还用于改善养殖水体的水质条件。有益菌的应用可以调节和改善养殖环境微生态平衡,控制和减少养殖动物爆发性病害的发生,提高养殖动物的的免疫力,增强其抗病能力,因此成为国内外研究的热点。本试验对从健康斑节对虾(Penaeus monodon)幼体分离的菌株L1及从养殖水体中防污附钢片的微生物粘膜中分离的菌株L2和L3,采用琼脂扩散法进行体外拮抗试验,测定其抑菌图谱。这三株海洋细菌均对鲈鱼病原鳗弧菌W1(Vibrio anguillarum)表现出较强的抑菌作用。根据细菌形态和生理生化特征和16S rDNA序列分析,鉴定这三株海洋有益菌菌均属假交替单胞菌属( Pseudoalteromonas ),其中L1是橙色假交替单胞菌(Pseudoalteromonas aurantia) , L2是杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida), L3与柠檬假交替单胞菌(Pseudoalteromonas citrea)的亲缘关系最近。采用玻璃纸覆盖平板法制备菌株L1、L2和L3的胞外产物,优化培养条件,结果表明:菌株L1在28℃下培养48 h、菌株L2在22℃下培养48 h、菌株L3在25℃下培养24 h制备的胞外产物抑菌活性最高。对其胞外产物进行凝胶层析部分纯化后,进行温度、pH和蛋白酶K处理,结果表明热处理、酸碱处理和蛋白酶消化均可使其活性丧失,表明菌株L1、L2和L3的胞外活性物质含蛋白质。