龙须菜营养成分分析及其藻红蛋白的分离、纯化与生理功能研究

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对采自南澳海域的龙须菜营养成分进行了分析,并对其有害元素Hg、Pb、As进行了测定。结果表明:龙须菜粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、多糖、灰分含量分别为(%):21、0.46、6.25、43.76、32.1、28.82,并富含人体8种必需氨基酸和牛磺酸及Fe、Zn等必需微量元素。Hg、Pb的含量均符合国家食品安全卫生标准,As含量偏高于国家标准。与其他海藻相比,维生素C的含量也较高。说明龙须菜是一种具有较高营养价值的食用性海藻,具有较广阔的开发应用前景。 通过对细胞破碎方法、硫酸铵盐析以及不同层析方法对藻胆蛋白提取、纯化效果的比较,确定了从龙须菜中提取纯化藻胆蛋白的最优提取条件,即组织捣碎法破碎藻体细胞、45%饱和度硫酸铵沉淀藻胆蛋白、羟基磷灰石柱层析与SephadexG-100柱层析配合使用对藻胆蛋白进行纯化。在此条件下分离的藻红蛋白,其纯度 (A565nm/A280nm)可达4.0。经吸收光谱、荧光光谱、凝胶电泳等研究,证明龙须菜所含藻胆蛋白主要为藻红蛋白(PE),亦含有少量的藻蓝蛋白(PC)与别藻蓝蛋白(APC)。龙须菜藻红蛋白含有两个亚基,分子量分别为18KDa和24KDa,有三个吸收峰,分别位于498、540和566nm,为Ⅰ型R-藻红蛋白,在436nm、540nm激发光下,其荧光发射峰均为580nm。 分别采用Fenton体系和邻苯三酚-鲁米诺发光体系测定藻红蛋白粗提液及纯化的藻红蛋白清除·OH和O2·-的能力,结果表明,藻胆蛋白粗提物和分离的藻红蛋白均有清除体外自由基作用,但两者间存在差异。以小白鼠为试验动物,研究了龙须菜藻红蛋白体内的抗氧化活性,采用TBA(thiobarbituric acid)显色法测定小鼠血清中过氧化脂质代谢产物(LPO)含量,邻苯三酚自氧化法测定小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力,实验结果表明,藻红蛋白粗提物能剂量依赖性降低小鼠血清中过氧化脂质代谢产物含量,并可显著提高小鼠红细胞SOD活力,表现出较好的抗氧化性质,提示其具有一定的抗衰老作用。 本文还研究了龙须菜藻红蛋白(PE)粗提物对环磷酰胺(CP)诱发小鼠染色体突变的抑制作用和对小鼠荷S180实体瘤的抑制作用。试验结果表明,藻红蛋白粗提物可使环磷酰胺诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核率明显降低,具有显著的抗突变作用,且呈现一定的剂量效应关系;其对小鼠S180实体瘤的抑瘤
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