高良姜有效成分提取及工艺条件研究

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高良姜(Alpinia officinarumHanee.)为姜科山姜属植物,其根入药,为常用中药之一,收载于《中国药典》2005年版一部。性温、味辛,有温中散寒、理气止痛的作用,主治脘腹冷痛,呕吐、嗯气。现代药理学研究结果不仅与传统功效相吻合,而且显示了抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗菌等新的作用。为了更深入地研究中药高良姜的化学成分,寻找其活性物质,合理利用其药物资源,推动中药现代化的进程,本工作对高良姜进行了化学成分的系统研究。本文应用现代色谱技术对产于广东徐闻的高良姜的乙醇提取物进行了系统的分离,还对高良姜中的主要药用有效成分挥发油进行了分析研究,采用直接水蒸气蒸馏法(HD法)、有机溶剂连续回流提取法以及超声波辅助提取法提取高良姜中的挥发油成分,通过单因素实验设计优选了HD法提取高良姜挥发油的最佳工艺条件。运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对HD法、有机溶剂法提取及超声波辅助提取法提取的高良姜挥发油中的化学成分进行了分离鉴定,以峰面积归一化法测定了各组分的相对百分含量,并对比分析了不同提取方法对高良姜挥发油提取效果及化学成分的影响。另外,关于高良姜挥发油提取液对水产品的保鲜作用做了初步探索。经实验研究,得出以下结论:1.在HD法提取高良姜挥发油的过程中,提取时间是最主要因素,对高良姜挥发油提取具有极显著的影响;药材粉碎度是次要因素,对挥发油提取具有较显著的影响;浸泡时间是最次要因素,对挥发油提取的影响不显著。2.优选得出的HD法提取高良姜挥发油的最佳工艺组合条件为(料液比1:10)、药材粉碎度80目、浸泡时间2h、提取时间7h。在此提取条件下,高良姜挥发油得率为(0.342±0.011)mL/g。3.综合比较了不同提取方法的优缺点,结果表明,超声波辅助提取方法较省时、检测出的成分较多,而且用这种方法可以提取到水蒸气蒸馏法未能提取到的挥发性成分。因此,用水蒸气蒸馏法提取高良姜挥发油进行挥发性成分分析存在不足之处,索式回流提取和超声波辅助提取法可作为有效的补充方法。4.本实验采用离心薄层层析分离纯化高良姜中黄酮类化合物,经筛选后,选择展开剂为CH2Cl2:CH3OH=98:2,展开剂流量为3ml/min,用小离心管分支收集,每支1.5ml,整个洗脱过程约为50min。相对于传统的柱层析分离法,用离心薄层层析分离所用时间短,所用洗脱剂少,分离纯化较完全。经测定本实验采自湛江徐闻的高良姜中所含高良姜素的含量为6.89mg/g,经离心薄层层析分离提纯的得率为46.69%,纯度为89.2%。所提取的黄酮类化合物经过紫外光谱分析、红外光谱分析、熔点测定分析后,确定三种物质,分别是高良姜素、山柰素和槲皮素。5.通过感官评价、TVB-N值和PH值的测定,结果表明,高良姜挥发油提取液保鲜剂能够抑制罗非鱼保鲜过程中PH值和TVB-N值的变化,保持罗非鱼的感官质量,经定量分析,普通冰鲜鱼在4天后鱼体产生微臭,其它各项指标均超过鲜鱼的最低界限值,而贮藏于高良姜挥发油提取液冰中的罗非鱼,保鲜期长达8天,各项指标均在允许范围之内,与空白组相比,保鲜组罗非鱼的保鲜期至少可以延长3天以上。
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