早产儿母乳脂肪酸组成及体外消化特性研究

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甘油三酯(TAG)是早产儿母乳中最重要的营养素之一,但其组成和结构特征及消化规律目前尚不清楚。本论文旨在阐明早产儿母乳脂的脂肪酸组成和位置分布特征,及其在胃、小肠内的消化规律。主要研究内容包括:首先,就检测手段来说,目前还没有TAG上sn-3位脂肪酸的直接检测法。本研究基于兔胃脂肪酶(RGL)的sn-3位特异性,建立了人乳脂sn-3位脂肪酸的检测方法。以兔胃为原料制备、纯化获得特异性酶活为5.5 U/mg的RGL,以4%水解率为反应终点确定sn-3位脂肪酸的最优测定条件为:体系pH 4.0,底物/酶活=1 mg/5 U,反应时间为30 min。其次,采用气相色谱法分析早产儿母乳的总脂肪酸、sn-2位和sn-3位脂肪酸组成发现:1)构成早产儿母乳TAG的主要脂肪酸为C16:0、C18:1n-9和C18:2n-6,分别占总脂肪酸含量的21.21%~29.68%,20.21%~27.63%和14.32%~18.76%;2)母乳中C14:0、C15:0、C16:0和C22:6n-3主要分布在sn-2位,C20:3n-6主要分布在sn-3位;3)总脂肪酸中C18:2n-6和C20:4n-6,sn-2位上的C18:2n-6、C18:3n-3、C20:4n-6和C22:6n-3,sn-3位上的C20:4n-6均随哺乳期发展而发生显著变化;4)总脂肪酸中C18:3n-3和C20:4n-6的相对含量因妊娠期不同差异显著。第三,采用多变量分析法探究产妇生理学特征对早产儿母乳脂肪酸组成的影响发现:1)相较于过渡乳,初乳中长碳链饱和脂肪酸(LCSFAs)和单不饱和脂肪酸(MUFAs)的含量显著较低(p<0.001),中碳链饱和脂肪酸(MCSFAs)的含量显著较高(p<0.001);2)相较于中度早产儿和近足月儿初乳,早期早产儿初乳中MUFAs、LCSFAs和n-6族长碳链多不饱和脂肪酸的含量均显著较高(p<0.01),MCSFAs的含量显著较低(p<0.01);3)年龄大于30岁产妇对应初乳中C18:3n-3(p<0.05)和C22:6n-3(p<0.05)的含量显著较低。最后,建立了体外胃-小肠消化动态模型,研究了乳脂的消化特点,结果表明:母乳脂在早产儿胃期消化速度缓慢,2 h时消化率仅为6.92%±0.28%,在小肠高效酯解,2h时消化率达到39.02%±2.46%。消化全期释放出的游离脂肪酸主要为C18:1n-9、C18:2n-6和C16:0,在小肠阶段释放出的2-单甘油酯的组成主要为C16:0、C14:0、C18:1n-9和C18:2n-6。总之,本研究初步阐明了早产儿母乳TAG的脂肪酸组成、结构特征及消化规律,为进一步研究早产儿脂质营养和开发专用乳脂提供了重要理论依据。
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