扇形文心兰(Erycina pusilla)离体快繁体系的建立

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扇形文心兰(Erycina pusilla)是文心兰亚族原生种兰花,植株娇小,叶片扁平细长呈扇形排列,生长快速,幼年期短,成苗能够一年不间断的开放大而且形状特别的亮黄色花朵,花期终年不停且不受季节影响,是作为商品化瓶内观赏花卉非常适合的材料。本文从种子离体非共生萌发,生根壮苗,瓶内开花诱导,类原球茎诱导增殖,瓶内授粉以及瓶内果实发育这几个方面,对扇形文心兰的繁殖体系进行探究,摸索出扇形文心兰在离体条件下完成其整个生命周期的体系,不仅为扇形文心兰作为商品化花卉的工业生产打下基础,还为其作为兰科一种生命周期短的模式植物的研究提供技术支持。研究结果主要如下:1)扇形文心兰种子成熟程度受其果实发育期间环境影响较大,仅以授粉后天数(Day After Pollination,DAP)为标准偏差较大,难以确定播种适宜的DAP。结合DAP与形态指标,以果实发育超过110DAP,果实外棱转黄状态为合适播种的成熟程度,可操作性强且准确度高。2)天然附加物对扇形文心兰的萌发有着较大的影响,在椰乳、香蕉汁和马铃薯汁三种天然附加物中,以马铃薯汁的促进效果最为显著。花多多2号作为便捷性水溶花肥,相较于传统的MS和兰花常用的花宝1号,效果最好。通过运用正交试验资料直观分析方法,从试验中各因素极差表明因素主要效应的大小为天然附加物>水解蛋白>基础培养基>糖浓度,并推断出种子离体萌发的最优条件为3 g/L花多多2号+25 g/L蔗糖+2 g/L水解酪蛋白+10%马铃薯汁。正交实验中最优组培养基配方为:3 g/L花多多2号+20 g/L蔗糖+2 g/L水解酪蛋白+10%马铃薯汁,该条件下种子萌发率达到35.31%。3)椰乳相较马铃薯和香蕉对扇形文心兰生根壮苗促进效果最好,生根壮苗较优培养基方案为:1/2MS+20 g/L糖+0.5 mg/L NAA+10%椰乳+1 g/L活性炭+4.5 g/L琼脂,在该条件下培养60d时成活率为93.75%;培养100d时,扇形文心兰平均鲜重由最初的5.70 mg/株达到了194.80 mg/株,增加至34倍。4)扇形文心兰类原球茎诱导较为容易,不添加PGRs也有一定的诱导率,1 mg/L IBA+1mg/L NAA诱导率最高且死亡率最低,扇形文心兰PLBs诱导的适宜方案为:3 g/L花多多2号+25 g/L糖+10%椰乳+2 g/L大豆水解蛋白+1 g/L活性炭+4.5 g/L琼脂+1 mg/L IBA+1 mg/L NAA,诱导率比空白对照高出20%可达50%,死亡率比空白对照低5%为30%。5)花宝1号作为便捷的水溶性花肥,对扇形文心兰开花诱导效果较MS、1/2MS培养基更优,且在播种8个月时就有一定的开花率,适宜扇形文心兰试管内开花的培养基为3 g/L花宝1号+1 mg/L 6-BA+1 mg/LABA+40 g/L蔗糖,花蕾诱导率20%,开花诱导率5.56%。6)光照强度对扇形文心兰开花影响较大,光强过高或太弱都会使开花率降低,63μmol/m2s是最适合扇形文心兰试管开花的光照强度,此光强下,开花率达到23.33%。7)扇形文心兰果实发育培养基较优方案为3 g/L花多多10号+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+10%马铃薯汁+1 g/L活性炭+4.5 g/L琼脂,授粉成功后于25°C、光照时间12 h/d、光照强度63μmol/m2s下培养130 d即达到可播种状态。
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