定量光激发荧光技术在早期光滑面龋损诊断预防中的基础和应用研究

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目的:采用定量光激发荧光技术(Quantitative Light-induced Fluorescence,QLF),通过对牙釉质光滑面早期龋损在体外恒化器龋病模型中脱矿和再矿化的过程进行研究,结合扫描电镜、激光扫描共聚焦显微镜等诊断方法,评价定量光激发荧光技术用于评价光滑面早期龋损矿物质含量变化的效果;探讨使用QLF技术检测光滑面早期龋损发生再矿化的时间:同时在临床试验中通过比较含有两种不同氟化物的牙膏在六个月内对受试人群光滑面早期龋损的临床抑制效果,评价QLF技术用于临床试验中纵向监测病损脱矿再矿化的能力。本研究分为三个部分:一、定量光激发荧光技术评价含氟牙膏抑制光滑面早期龋损效果的实验研究材料和方法:将牙釉质块开窗后分为3组:1450ppm含氟化钠(sodiumfluoride,NaF)牙膏组、1450ppm含单氟磷酸钠(sodium monofluorophosphate,MFP)牙膏组和不含氟牙膏对照组,每组10个样本。在体外恒化器龋病模型中,将完整的牙釉质样本进行脱矿循环,已经在体外形成脱矿病损的样本进行再矿化循环。用定量光激发荧光技术分析病损脱矿和再矿化前后的面积、荧光损失和总荧光损失量,扫描电镜观察各组切片脱矿和再矿化前后的形态学变化,激光扫描共聚焦显微镜分析脱矿和再矿化后矿物质含量的变化。结果:①在体外恒化器龋病模型中,三组牙釉质表面开窗区均形成了不同程度的早期龋病损。不含氟牙膏组病损面积(Area)较大,荧光损失量(△F)较高,总荧光损失量以10为底的对数值(LG△Q)较大(P<0.05),氟化钠牙膏组和单氟磷酸钠牙膏组之间无统计学差异(P>0.05);体外脱矿的病损连续干预5天以后,三组病损Area、△F和LG△Q变化不明显,三个处理组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。②扫描电镜观察,脱矿循环中不含氟牙膏处理组较含氟牙膏组釉质开窗区表面粗糙,出现大小不等分布不均匀的孔穴状脱矿区:再矿化循环中,含氟牙膏组出现了牙釉质表面再矿化的表现,而不含氟牙膏组的变化不明显。③激光共聚焦显微镜观察结果显示:脱矿循环中不含氟处理组形成的病损在荧光面积、平均荧光量和总荧光量三个参数上都明显高于其他两个含氟牙膏处理组,其差异有统计学意义(P<0.05):再矿化循环中,三组脱矿病损的荧光面积、平均荧光量和总荧光量之间均无统计学差异(P>0.05)。④脱矿循环和再矿化循环后,QLF的分析结果与激光共聚焦显微镜结果之间具有较好的相关性(r>0.70),QLF的分析结果能够客观的反映脱矿病损区矿物质含量的变化。二、QLF评价光滑面早期龋损再矿化发生时间的临床试验研究材料和方法:选取符合纳入标准的成都市11—14岁上颌前牙有早期光滑面龋的中小学生24名参加研究。将其分为含MFP(氟浓度为1450ppm)牙膏组和不含氟牙膏组。对受试者进行相同的口腔健康教育及刷牙方法的培训。每周拍摄受检者前牙光滑面早期龋的QLF照片,连续八周。由经过严格培训的人员对QLF照片进行分析,得出每次检查的△F、Area和△Q。结果:本研究对24名受检者共101处上颌前牙光滑面早期龋损进行了为期8周的临床研究,两组受检者的早期龋损均出现不同程度的好转,但两组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。结果表明:QLF所能检测到的光滑面早期龋损发生再矿化的时间为3周;QLF难以在短期内(8周内)对两种含氟牙膏的效果是否存在差异做出判断,使用QLF作为诊断手段的临床研究需要设计更长的研究时间。三、QLF评价含氟牙膏对光滑面早期龋损抑制效果的临床试验研究材料和方法:选取符合纳入标准的成都市11—14岁上颌前牙有早期光滑面龋的中小学生305名参加研究。以受检者所在的学校为单位,采用随机的方法分为3组,分别向受试学生发放市售的含有NaF、MFP(氟浓度均为1450ppm)的含氟牙膏和不含氟的牙膏,并对305名学生进行相同的口腔健康教育及刷牙方法的培训。拍摄所有的受检者上颌前牙光滑面早期龋损基线、3个月和6个月时的QLF照片并保存。由一名经过严格培训的人员使用软件QLF 2.00g对其进行分析,界定病损区的范围,并得出每次检查的△F、Area和△Q。结果:296个受试者完成了6个月的临床研究。3个月时QLF检查的结果显示,所有受检者上颌前牙光滑面早期龋损均出现不同程度的好转:病损的面积变小、平均荧光损失降低、总荧光损失量以10为底的对数值减小,三组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。6个月检查时,296名受检者上颌前牙光滑面早期龋损均较基线时出现明显的好转,其中7名受检者的早期龋损在QLF图像中完全消失。NaF组、MFP组均与不含氟牙膏组的差异有统计学意义(P<0.05),两种氟化物之间没有统计学差异(P>0.05)。综上所述,定量光激发荧光技术检测体外恒化器模型中光滑面早期龋损脱矿和再矿化过程的结果和激光共聚焦显微镜检测结果一致,可以用来反映龋病过程中的矿物质含量的变化;通过在六个月的临床研究中采用QLF技术进行分析,得出了含有NaF和MFP的两种含氟牙膏(氟浓度为1450ppm)均对光滑面早期龋损具有抑制效果的结论,两种氟化物之间没有统计学差异;QLF作为一种对早期龋损矿物质含量进行定量的诊断方法,能够用于纵向病变跟踪监测和评价不同龋病干预措施的效果;本研究通过受检者在监督下刷牙和使用QLF这种敏感而客观的龋病定量诊断方法,在样本量较少和研究时间较短的情况下得出了有意义的结果,有效节约了研究时间和研究经费,值得在今后的研究中推广使用。
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