论文部分内容阅读
担子纲白腐菌(White-rot fungi)分泌的胞外木素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)在木素降解过程中起主导作用。本论文主要是对白腐菌产LiP发酵条件及其酶液对稻草中木素降解的研究。 在静置培养条件下,产酶培养基的最优组成为(L-1):葡萄糖0.2g,糊精1.8g,酒石酸铵24mM,藜芦醇(veratryl alcohol,VA)3mM,吐温80 1g,醋酸缓冲液10mM(pH4.5),KH2PO4 4g,MgSO4.7HO2 0.2g,CaCl2.2HO2 0.4g,VB11mg,微量元素混合液(MnSO4·H2O含量改为0.06g/L)70ml,产酶温度为37℃,白腐菌此条件下产生的LiP最高酶活达7560U/L(8d);在振荡培养条件下,产酶培养基的最优组成为(L-1):葡萄糖10g,酒石酸铵2mM,藜芦醇3mM,吐温80 1g,醋酸缓冲液10mM(pH4.5),KH2PO4 3g,MgSO4.7HO2 1g,CaCl2.2H2O 0.05g,VB1 1mg,微量元素混合液(MnSO4·H2O含量改为0.06g/L)70ml,培养条件为37℃,160r/min,此条件下白腐菌产生的LiP最高酶活达6500U/L(8d)。 通过SDS-PAGE简单分析了不同培养条件下粗酶液中LiP的合成情况,凝胶中蛋白带的多少与LiP活力的高低相对应。这说明,在培养条件改变时,由于菌体分泌的LiP同工酶在数量上有所增加,使得整体的LiP酶活力相应提高。 经过对LiP发酵条件的研究,使其过量生产,并利用LiP粗酶液直接降解稻草,木素的降解率为8.7%,经红外光谱分析其降解产物,推断LiP在体外降解稻草的反应主要是氧化反应。