目的:以SD雄性大鼠为研究对象,建立氯胺酮滥用致膀胱组织损害的动物模型,并在此基础上进行戒断和双安口服液治疗,通过HE、realtime-PCR、western blot、免疫组织化学等方法,探索SD大鼠膀胱上皮功能状态及其细胞凋亡变化情况,以期阐明氯胺酮滥用对膀胱组织的损害及双安口服液的治疗机制,为临床治疗提供新的治疗手段以及为新药物的开发提供实验依据。方法:1.建立动物模型,将96只10周龄SD雄性大鼠随机分为8组,即对照组、氯胺酮建模组[3组,分别为氯胺酮10 mg/kg(K10组)、30 mg/kg(K30组)和60mg/kg(K60组)]、氯胺酮30 mg/kg戒断治疗组(K30T组)和氯胺酮30 mg/kg双安口服液治疗组[3组,分别为双安口服液3750 mg/kg(K30L组)、11250 mg/kg(K30M组)和18750 mg/kg(K30H组)],每组12只。各组大鼠连续30天腹腔注射不同剂量氯胺酮/生理盐水后,K30T组给予停药2周处理,双安口服液治疗组分别给予双安口服液低、中、高3种剂量灌胃2周处理。各组大鼠均于末次给药后24 h处死取材;2.观察氯胺酮给药期间各组大鼠行为学变化;3.采用HE染色观察大鼠泌尿系统(肾脏、输尿管、膀胱)的组织结构及其脏器系数变化情况;4.通过realtime-PCR、western blot、免疫组织化学法分别检测(1)膀胱上皮细胞紧密连接蛋白E-cad和ZO-1;(2)膀胱组织组胺受体H1;(3)膀胱上皮细胞中内质网应激通路成员GRP78、PERK、ATF-4、CHOP、Caspase-12的表达情况。结果:行为学观察:与对照组相比,建模组大鼠在给药后活动能力明显增强。随着药物剂量的加大,先后出现打喷嚏、甩头、站立不稳且伴有攻击性等行为,药效作用时间也随着剂量的加大而延长。体重变化情况:对照组和建模组大鼠体重变化组间无统计学差异(P>0.05);在给予双安口服液治疗或戒断治疗后发现K30T和K30L组体重增加,K30M组和K30H组体重降低,其中K30H组体重增长明显低于其他3组(P<0.01)。大鼠泌尿系统组织结构变化结果显示:与对照组相比,建模组的泌尿系统(肾脏、输尿管、膀胱)较对照组结构出现不同程度的变化,随着氯胺酮给药剂量的加大,病变程度加深,而双安口服液治疗组和戒断治疗组能有效的改善组织病变程度;动物模型脏器系数测定结果显示:未发现各组大鼠的肾脏、输尿管和膀胱的脏器系数有统计学差异(P>0.05),提示各组大鼠的肾脏、输尿管、膀胱组织尚未产生实质性病变。大鼠膀胱上皮组织细胞间紧密连接蛋白表达变化结果显示:与对照组相比,不同剂量氯胺酮给药均能抑制E-cad和ZO-1的表达,戒断治疗组改变不明显,而不同剂量双安口服液治疗组均能上调其表达,且其中以K30M组效果最好,提示氯胺酮可能会通过抑制膀胱上皮细胞紧密连接蛋白表达,来导致膀胱上皮组织屏障功能受损。戒断治疗组改善效果不好,而双安口服液能有效的改善这种状况,起到修复膀胱上皮功能的作用。大鼠膀胱组织组胺受体表达情况显示:建模组大鼠膀胱组织中的H1呈现出高表达,戒断治疗和双安口服液治疗均则下调其表达。提示氯胺酮可通过上调膀胱组织中组胺受体的表达,增加膀胱上皮通透性,而双安口服液治疗组和戒断组能改善这种趋势。大鼠膀胱上皮细胞内质网应激诱导的细胞凋亡信号通路检测结果显示:不同剂量氯胺酮给药均能同时上调GRP78、PERK、ATF-4、CHOP、Caspase-12的蛋白表达,使膀胱组织处于内质网应激状态并触发凋亡;而戒断治疗组和双安口服液治疗组均能逆转这种趋势,且双安口服液的修复效果优于戒断治疗组。提示氯胺酮可通过内质网应激途径诱发凋亡,戒断治疗和双安口服液都能有效抑制此效应。结论:通过腹腔注射氯胺酮可成功建立氯胺酮滥用致大鼠膀胱组织损害的动物模型。氯胺酮可通过引起大鼠泌尿系统组织结构改变、降低大鼠膀胱上皮细胞紧密连接蛋白表达、上调膀胱组胺受体H1表达以及触发大鼠膀胱上皮细胞凋亡导致大鼠膀胱组织损伤。戒断治疗和双安口服液治疗都能改善膀胱组织损伤状态,且双安口服液的修复效果更好。