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目的：探讨非小细胞肺癌(Non-small cel lung cancer，NSCLC)原发灶、淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达及其相关性，并对抗原加工机器组分TAP1、LMP2 mRNA缺陷及原癌基因K-ras点突变、C-erbB-2扩增对NSCLC经典HLA-Ⅰ类抗原表达的调控作用进行初步探索。方法：(1)应用流式细胞术检测65例NSCLC原发灶及31例淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达(正常肺组织及淋巴结组织作对照)。(2)应用RT-PCR技术检测31例非小细胞肺癌原发灶、31例淋巴结转移灶(根据流式细胞术检测其经典HLA-Ⅰ类抗原呈阴性表达或低表达)TAP1mRNA、LMP2 mRNA的表达(经典HLA-Ⅰ类抗原呈阳性表达的肺癌原发灶及正常肺组织、淋巴结组织作对照)。(3)应用差别PCR技术、PCR-RFLP技术检测65例肺癌原发灶、31例淋巴结转移灶(根据流式细胞术检测其经典HLA-Ⅰ类抗原呈阴性表达或低表达)C-erbB-2扩增及K-ras基因第12位密码子点突变(正常肺组织及淋巴结组织作对照)。并根据不同的变量类型及目的，分别采用t检验，Spearman相关分析，卡方检验，Logistic回归分析及Fisher’s精确概率法进行统计学分析。结果：(1)65例肺癌原发灶中有58例(89.2％)表现为经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调(阴性表达和低表达)。存在淋巴结转移的肺癌原发灶其经典HLA-Ⅰ类抗原的平均表达率(31.89±9.56％)低于无淋巴结转移肺癌原发灶的经典HLA-Ⅰ类抗原的平均表达率(42.46±10.380％)，但差异无统计学意义(t=1.57，P＞0.05)。淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达率(15.35±6.240％)明显低于肺癌原发灶(39.68±12.460％)(t=2.06，P＜0.05)，且与肺癌原发灶经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调明显呈正相关(r_s=0.487，P＜0.01)。(2)经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调(阴性表达和低表达)的肺癌原发灶中，TAP1 mRNA表达率为41.9％(13／31)，经典HLA-Ⅰ类抗原阳性表达的肺癌原发灶TAP1 mRNA表达率为88.9％(8／9)，二者相比，有统计学差别(P=0.014)。经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肺癌原发灶LMP2 mRNA表达率为38.7％(12／31)，经典HLA-Ⅰ类抗原阳性表达的肺癌原发灶LMP2 mRNA表达率为77.8％(7／9)，二者相比，有统计学差别(P=0.039)。经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的淋巴结癌转移灶中TAP1 mRNA表达率为16.1％(5／31)，明显低于肺癌原发灶(x~2=5.01，P＜0.05)；LMP2 mRNA表达率为12.9％(4／31)，也同样低于肺癌原发灶(x~2=5.39，P＜0.05)。(3)肺癌原发灶K-ras基因突变率为23.1％(15／65)，在经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肺癌原发灶中表达，在经典HLA-Ⅰ类抗原表达呈阳性的肺癌原发灶中不表达，其在经典HLA-Ⅰ类抗原呈阴性表达的肺癌原发灶中的表达率为54.5％(6／11)，在呈低表达的肺癌原发灶中的表达率为20％(9／45)，存在明显差异(x~2=5.38，P＜0.05)。在31例淋巴结转移灶中，K-ras基因突变率为41.9％(13／31)，比肺癌原发灶高，但差别无统计学意义(x~2=3.56，P＞0.05)。(4)肺癌原发灶C-erbB-2扩增率为32.3％(21／65)，在经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达、低表达、阳性表达的肺癌原发灶中均有表达，其中在经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达与阳性表达的肺癌原发灶中，C-erbB-2扩增率存在差异(p=0.02)。淋巴结转移灶中亦表现出C-erbB-2扩增，扩增率为48.4％(15／31)，高于肺癌原发灶，但统计学分析无差别(x~2=2.32，P＞0.05)。经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达与低表达淋巴结癌转移组，C-erbB-2扩增率比较无统计学差异(P=0.18)。结论：(1)流式细胞术可有效检测NSCLC癌组织经典HLA-Ⅰ类抗原的表达；存在淋巴结转移的肺癌原发灶与无淋巴结转移的肺癌原发灶相比，其经典HLA-Ⅰ类抗原表达无差异；淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达率明显低于肺癌原发灶，二者明显呈正相关，表明原发灶中存在经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肿瘤细胞更具转移潜能，经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调是肺癌淋巴结转移的机制之一。(2)TAP1、LMP2 mRNA的表达缺陷是NSCLC原发灶及淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ抗原表达下调的机制之一，在淋巴结癌转移灶表现更明显。(3)癌基因K-ras突变和C-erbB-2扩增与NSCLC原发灶及淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原表达呈负相关。第一部分流式细胞术检测非小细胞肺癌经典HLA-Ⅰ类抗原的表达目的：探讨非小细胞肺癌原发灶、淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达及其相关性，并探讨经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调与淋巴结癌转移的关系。方法：应用流式细胞术检测65例NSCLC原发灶及31例淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达(正常肺组织及淋巴结组织作对照)，t检验比较二者经典HLA-Ⅰ类抗原表达的差别，Spearman相关分析比较二者经典HLA-Ⅰ类抗原表达的相关性，Logistic多因素回归分析判定经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调与肺癌淋巴结转移的关系。结果：65例肺癌原发灶中有58例(89.2％)表现为经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调。存在淋巴结转移的肺癌原发灶经典HLA-Ⅰ类抗原的平均表达率(31.89±9.56％)低于无淋巴结转移的肺癌原发灶(42.46±10.38％)，但差异无统计学意义(t=1.57，P＞0.05)。淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达率(15.35±6.24％)明显低于肺癌原发灶(39.68±12.46％)(t=2.06，P＜0.05)，且与肺癌原发灶经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调明显呈正相关(r_s=0.487，P＜0.01)。Logistic回归分析显示，经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达(OR=2.570，P=0.036)是肺癌淋巴结转移的危险因素。结论：流式细胞术可有效检测NSCLC癌组织经典HLA-Ⅰ类抗原的表达；淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原的表达率明显低于肺癌原发灶的表达，二者明显呈正相关，表明原发灶中存在经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肿瘤细胞更具转移潜能，经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调是肺癌淋巴结转移的机制之一。第二部分非小细胞肺癌TAP1、LMP2 mRNA缺失与经典HLA-Ⅰ抗原表达下调的关系目的：探讨抗原加工机器组分TAP1、LMP2 mRNA缺陷与NSCLC原发灶、淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ抗原表达下调(阴性表达或低表达)的关系，并探讨TAP1、LMP2 mRNA缺失与NSCLC淋巴结转移的相关性。方法：应用RT-PCR技术检测31例非小细胞肺癌原发灶、31例淋巴结转移灶(根据流式细胞术检测其经典HLA-Ⅰ类抗原呈阴性表达或低表达)TAP1、LMP2 mRNA的表达(经典HLA-Ⅰ类抗原呈阳性表达的肺癌组织及正常肺组织、淋巴结组织作对照)，卡方检验或Fisher’s精确概率法比较其差异性，Logistic回归分析判断TAP1、LMP2 mRNA缺失与NSCLC淋巴结癌转移的相关性。结果：经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肺癌原发灶中，TAP1 mRNA表达率为41.9％(13／31)，经典HLA-Ⅰ类抗原阳性表达的肺癌原发灶TAP1 mRNA表达率为88.9％(8／9)，二者相比，有统计学差别(P=0.014：)。经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肺癌原发灶LMP2 mRNA表达率为38.7％(12／31)，经典HLA-Ⅰ类抗原阳性表达的肺癌原发灶LMP2 mRNA表达率为77.8％(7／9)，二者相比，有统计学差别(P=0.039)。经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的淋巴结癌转移灶中TAP1 mRNA表达率为16.1％(5／31)，明显低于经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肺癌原发灶(x~2=5.01，P＜0.05)；LMP2 mRNA表达率为12.9％(4／31)，也同样低于肺癌原发灶(x~2=5.39，P＜0.05)。Logistic回归分析显示，TAP1+LMP2阴性表达(OR=6.834，P=0.008)、TAP1阴性表达(OR=3.258，P=0.038)、LMP2阴性表达(OR=2.853，P=0.023)是肺癌淋巴结转移的危险因素。结论：TAP1、LMP2 mRNA的表达缺陷是NSCLC原发灶及淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ抗原表达下调的机制之一，在淋巴结癌转移灶表现更明显。TAP1、LMP2 mRNA表达缺陷是NSCLC淋巴结癌转移的危险因素。第三部分癌基因K-ras和C-erbB-2与非小细胞肺癌经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的关系目的：探讨癌基因K-ras突变和C-erbB-2扩增与非小细胞肺癌原发灶及淋巴结癌转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的关系。方法：分别应用差别PCR技术、PCR-RFLP技术检测65例肺癌组织、31例淋巴结转移灶(根据流式细胞术检测其经典HLA-Ⅰ类抗原呈阴性表达或低表达)C-erbB-2扩增及K-ras基因第12位密码子点突变(正常肺组织及淋巴结组织作对照)，应用卡方及Fisher’s精确概率法进行统计学分析。结果：(1)肺癌原发灶K-ras基因突变率为23.1％(15／65)，在经典HLA-Ⅰ类抗原表达下调的肺癌原发灶中表达，在经典HLA-Ⅰ类抗原表达呈阳性的肺癌原发灶中不表达，其在呈阴性表达的肺癌原发灶中的表达率为54.5％(6／11)，在呈低表达的肺癌原发灶中的表达率为20％(9／45)，存在明显差异(x~2=5.38，P＜0.05)。在31例淋巴结转移灶中，K-ras基因突变率为41.9％(13／31)，比肺癌原发灶高，但差别无统计学意义(x~2=3.56，P＞0.05)。淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达组，K-ras基因突变率为50％(11／22)，高于低表达组22.2％(2／9)，但统计学差别不明显(P=0.12)。(2)肺癌原发灶C-erbB-2扩增率为32.3％(21／65)，在经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达、低表达、阳性表达的肺癌原发灶中均有表达，其中在经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达与阳性表达的肺癌原发灶中，C-erbB-2扩增率存在差异(p=0.02)。淋巴结转移灶中亦表现出C-erbB-2扩增，扩增率为48.4％(15／31)，高于肺癌原发灶，但统计学分析无差别(x~2=2.32，P＞0.05)。经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达与低表达淋巴结癌转移组，C-erbB-2扩增率比较无统计学差异(P=0.18)。(3)K-ras基因突变和C-erbB-2扩增共表达在65例肺癌原发灶中共检测到12例，占18.5％(12／65)，在经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达组共表达率为45.5％(5／11)，高于经典HLA-Ⅰ类抗原低表达组的15.6％(7／45)，有统计学差异(x~2=4.69，P＜0.05)。淋巴结转移灶中二者共表达占29％(9／31)，高于肺癌原发灶，但统计分析无明显差别(x~2=1.37，P＞0.05)。二者共表达在淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达组与低表达组分别为36.4％(8／22)、11％(1／9)，经典HLA-Ⅰ类抗原阴性表达组高于低表达组，但无统计学差异(P=0.14)。结论：癌基因K-ras突变和C-erbB-2扩增与NSCLC原发灶及淋巴结转移灶经典HLA-Ⅰ类抗原表达呈负相关。