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目的建立戊四唑癫痫模型,采用丙戊酸钠、乌灵胶囊单用或者联合使用,观察戊四唑致痫大鼠癫痫发作情况;通过HE染色法考察对癫痫大鼠海马神经元保护作用的影响;通过免疫组织化学法、实时定量PCR法和Western Blot检测丙戊酸钠联合乌灵胶囊对癫痫大鼠海马中NMDAR1、GABRA2、GRM5、IL-1β、NF-?B/p65和TLR4表达的影响。方法将SD大鼠雌雄分别随机分为5组,每组10只,A组为空白对照组,B组为模型组,C组为丙戊酸钠(VPA)组,D组为乌灵胶囊组,E组为丙戊酸钠联合乌灵胶囊组。各组均选用灌胃法给予处理药物,A组与B组给予等体积生理盐水;C组给予VPA;D组给予乌灵胶囊;E组给予VPA和乌灵胶囊。每日上午9时左右给药,给药l h后,A组腹腔注射生理盐水,其他各组腹腔注射戊四唑(PTZ)溶液,每日1次,连续4周。腹腔注射PTZ溶液后,观察记录半小时内大鼠痫性发作级别。4周造模成功后,于第29天在各组随机选出5只大鼠,用10%水合氯醛腹腔麻醉后,采用生理盐水和4%甲醛灌注后断头取脑,制备石蜡切片,进行普通病理学检查以及用于免疫组织化学法检测各组大鼠海马中NMDAR1、GABRA2、GRM5、IL-1β、NF-?B/p65和TLR4表达的情况。各组剩余大鼠,用10%水合氯醛腹腔麻醉后,断头取出完整海马组织,通过实时定量PCR和Western Blot检测各组大鼠海马中NMDAR1、GABRA2、GRM5、IL-1β、NF-?B/p65和TLR4表达的情况。结果1.在戊四唑诱导的癫痫模型中,丙戊酸钠联合乌灵胶囊组可有效抑制癫痫发作,显著降低癫痫发作的级别和总次数,效果优于丙戊酸钠组和乌灵胶囊组。2.丙戊酸钠组、乌灵胶囊组和丙戊酸钠联合乌灵胶囊组均能改善海马CA3区神经元细胞的损伤,但丙戊酸钠组和丙戊酸钠联合乌灵胶囊组效果优于乌灵胶囊组。3.免疫组织化学法检测NMDAR1、GRM5、NF-?B/p65、TLR4和IL-1β在空白对照组大鼠海马中表达较少;在模型组大鼠海马中有大量表达;在丙戊酸钠组、乌灵胶囊组、丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马中表达量明显降低,各组差异均有统计学意义(P<0.05)。其中IL-1β在空白对照组和丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马表达中无明显差异(P>0.05)。GABRA2在空白对照组大鼠海马大量表达,在模型组大鼠海马中表达较少;在丙戊酸钠组、乌灵胶囊组、丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马中表达量明显增多,各组差异均有统计学意义(P<0.05)。4.实时定量PCR检测NMDAR1、GRM5、NF-?B/p65、TLR4和IL-1β在空白对照组大鼠海马中表达较少,在模型组大鼠海马中有大量表达,在丙戊酸钠组、乌灵胶囊组、丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马中表达趋势明显降低。GABRA2在空白对照组大鼠海马中大量表达,在模型组大鼠海马中表达较少;在丙戊酸钠组、乌灵胶囊组、丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马中表达量有上升趋势。5.Western Blot检测NMDAR1、GRM5、NF-?B/p65、TLR4和IL-1β在空白对照组大鼠海马中表达较少,在模型组大鼠海马中有大量表达,在丙戊酸钠组、乌灵胶囊组、丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马中表达量明显降低(P<0.05)。GABRA2在空白对照组大鼠海马大量表达,在模型组大鼠海马中表达较少;在丙戊酸钠组、乌灵胶囊组、丙戊酸钠联合乌灵胶囊组大鼠海马中表达量显著上升(P<0.05)。结论丙戊酸钠联合乌灵胶囊能更好地控制癫痫大鼠痫性发作,减轻海马神经元损伤,其机制可能与通过?-氨基丁酸/谷氨酸信号通路和TLR4/NF-?B信号通路两条相关联通路,增加NMDAR1、GRM5、NF-?B/p65、TLR4和IL-1β的表达,减少GABRA2表达有关。