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研究背景 1998年日本学者Watanabe等首次报导了单独用H.pylori长期感染蒙古沙土鼠能成功地诱发出胃腺癌，在实验动物上直接证实了H.pylori与胃癌的发生关系。但H.pylori感染与胃癌发生的机制目前尚不明了，且相关的研究报道不多。 目的/意义 （1）建立H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型，验证该模型出现的病理改变及腺胃肿瘤发生情况；（2）在H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型基础上，探讨H.pylori感染与胃癌发生的可能机制。 材料和方法 （1）采用国际标准菌株NCTC11637建立H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型；（2）H.pylori感染与胃癌形成机制的实验研究：①用免疫组化方法，同步检测BrdU及PCNA在H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃中的表达；②TUNEL法检测H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃的胃粘膜上皮细胞凋亡的变化情况；③用原位杂交方法，检测EGF mRNA及EGFR mRNA、FAS mRNA及FASL mRNA在H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃中的表达。④用半定量反转录聚合酶链反应，在mRNA水平检测H.pylori感染蒙古沙上鼠胃窦粘膜中cyclin E及c-fos的表达。⑤用免疫组化方法，在蛋白水平检测H.pylori感染蒙古沙土鼠胃窦粘膜中cyclin E及c-fos的表达。 结果 （1）成功建立了H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型，其胃粘膜的组织学变化显示，H.pylori感染可致正常胃粘膜→慢性胃炎→萎缩→肠化生→异型增生的发展过程，但未见早期癌表现。（2）H.pylori感染 与胃癌形成机制的实验研究：①BrdU及PCNA兔疫组化染色结果显示 H．”1mi感染能引起胃窦粘膜上皮细胞增殖增加（A0．0引：②＊＊F 及EGFR原位杂交检测结果显示随着H．pylon感染时间的增加，炎症 及病变程度的加重，EGF mANA及EGFR mRNA的阳性信号表达呈逐二 渐增加的趋势（HO．05）；③原位细胞凋亡检测结果显示接种H．pylon后 25周内能引起胃窦粘膜上皮细胞凋亡增加。随着感染时间的延长，炎 症的加重，凋亡细胞指数呈逐渐增加的趋势（H O．05人接种H．p／叮 后 45周时，与25周时相比，胃窦粘膜上皮细胞凋亡指数呈逐渐递减的趋 势，65周时甚至明显低干正常值（产一0．05）；④FA S及FA SL原位杂交 检测结果显示随着H．pylon感染时间的延长，炎症及病变程度的加重， FASL InRNA的阳性信号表达有逐渐增加的趋势（HO．05）；H．pylon感 染55周前，FAS mRNA的阳性信号表达有逐渐增加的趋势；⑤半定量反 转录聚合酶链反应显示，H．pylon感染蒙古沙土鼠25周时，cyclinE mRNA水平的表达是正常对照的2．2倍，45周时是3．1倍；25周时。fos InRNA水平的表达是正常对照的2．5倍，45周时是2．1倍；③免疫组 织化学显示，H．pylon感染蒙古沙土鼠0周、25周、45周时，cyclin E 的阳性率分别为0、30％、50％，c－fos的阳性率分别为0、20％、40％。Cyclin E及c－fos在H．pylon感染蒙古沙土鼠45周的胃窦粘膜中的表达与对 照比，均有显著性增高（AO．05）。 结论 （1）H．pylon NCTC 11637易长期定植于蒙古沙土鼠腺胃，模型的稳 定性及重复性极佳，且与H．pylon感染人胃粘膜后出现的各种病理变 化极为类似。G）动物实验证实：H．pylon NCTC 11637定植于蒙古沙土 鼠腺胃65周时，可引起胃粘膜出现严重的萎缩、肠化生及不典型增生 等胃癌前病变，暂未发现早期癌。侣）H．pylon定植致胃窦粘膜上皮细 胞增殖和凋亡异常，对正常胃窦粘膜一慢性炎症一萎缩一肠化一不典型 增生的发展进程起重要作用。O）EGF炬GFR FasNasL在mRNA水平 的异常表达可能是H．pylofi定植致胃窦粘膜上皮细胞增殖和凋亡异常 的重要原因。历）H．pylon长期感染蒙古沙土鼠，致胃窦粘膜由正常向 不典型增生等癌前病变的演进过程中，有 cyclin E及 c－fos的异常表达。