本研究以无菌鸡作为悉生动物(Gnotobiotic Animals)模型。研究肠道内接种单一菌种(鸡源性乳酸杆菌)、或整个肠道菌群(盲肠内容物)对宿主脂肪代谢及与脂肪代谢相关基因表达、肠道黏膜结构与免疫功能的影响,揭示肠道菌群的功能和作用机理。试验一无菌鸡动物模型的建立为研究鸡肠道菌群对宿主的影响及作用机理,采用无菌工作间内放置孵化器和隔离器模式进行鸡的孵化和饲养,通过对SPF种蛋的无菌化处理和孵化、饲喂钴-60辐射灭菌饲料、高温灭菌水。饲喂肉仔鸡2周后,对鸡排泄物通过使用脑心浸液肉汤、硫乙醇酸钠肉汤、大豆蛋白胨肉汤和血琼脂平皿培养检测,并未发现检测菌。表明无菌鸡动物模型成功建立。试验二肠道菌群对仔鸡肠道发育、黏膜形态和免疫器官的影响本试验旨在以“无菌鸡”为模型,研究添加鸡源性乳酸杆菌和鸡盲肠内容物后,对仔鸡肠道发育、黏膜形态及免疫器官发育的影响。试验选用无特定病原体(SPF)种蛋80枚,经无菌孵化后,选择健康仔鸡60羽,分3组(每组20羽),转入3台无菌隔离器内饲养,并分别饲喂:无菌饲粮(CT组)、无菌饲粮+乳酸菌液(LB组)、无菌饲料+鸡盲肠内容物(CON组)。饲养21天后试验结束,于试验第7、14、21天从各处理组取6只进行屠宰,测定鸡肠道各段长度和免疫器官重量,并对肠道黏膜形态显微观察。结果显示:饲喂乳酸杆菌或盲肠内容物的仔鸡各阶段中的十二指肠,空肠长度均高于对照组,盲肠长度和体积均低于CT组的无菌鸡;仔鸡的脾脏指数高于CT组(P<0.01)。饲喂乳酸杆菌或盲肠内容物后仔鸡的十二指肠、空肠和回肠隐窝深度降低、绒毛高度/隐窝深度比值增大。本试验说明,饲喂肠道菌群能促进仔鸡肠道发育,盲肠体积变小;同时促进脾脏的发育,提高机体免疫力。试验三肠道菌群对仔鸡脂肪代谢的影响试验设计同试验二。饲养21天后试验结束,分别对血液生化指标、肝脂率腹脂率及与脂肪代谢相关基因表达量进行分析测定。结果显示:饲喂乳酸杆菌和盲肠内容物显著提高了仔鸡的腹脂率及肝脂率(P<0.05);饲喂乳酸杆菌和盲肠内容物显著提高了血清甘油三酯含量,显著降低了仔鸡血清胆固醇、高低密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.05)。且血清总蛋白、白蛋白水平在饲喂乳酸杆菌后显著降低,胆红素在饲喂盲肠内容物后显著降低(P<0.05);饲喂乳酸杆菌和盲肠内容物显著提高了脂肪组织中THRSP、PPARγ基因的mRNA表达量,显著降低了空肠组织中FAS基因的mRNA表达量(P<0.05),肝脏组织中SREBP-1、Ch REBP基因的mRNA表达量在饲喂盲肠内容物后显著提高(P<0.05),而饲喂乳酸杆菌对其无影响。试验结果说明:肠道菌群可调控脂肪代谢相关基因的表达,进而影响仔鸡脂类代谢。试验四肠道菌群对ND疫苗后仔鸡免疫器官和免疫功能的影响本试验再次建立“无菌鸡”模型,研究肠道菌群(乳酸杆菌及盲肠微生物)联合新城疫疫苗免疫对仔鸡免疫器官和免疫功能的影响。试验选用SPF种蛋80枚,经无菌孵化后,选择健康仔鸡60羽,分3组(每组20羽),转入3台无菌隔离器内饲养,并分别饲喂:无菌饲料(CT组)、无菌饲料+乳酸杆菌液(LB组)、无菌饲料+鸡盲肠内容物(CON组);21天后颈皮注射新城疫疫苗。于免疫后第1、7、14天从各处理取6只进行屠宰,分别对血清生化指标、免疫球蛋白、免疫器官水平、抗体水平及小肠黏膜SIgA含量进行测定。结果显示:(1)饲喂乳酸杆菌培养物(LB)和盲肠内容物(CON)提高肝脏和脾脏指数,通过免疫注射新城疫疫苗后无菌鸡的肝脏和脾脏指数都得到提高。(2)饲喂乳酸杆菌显著降低了前期(1-7天)血清中总蛋白、白蛋白、IgG和IgM含量(P<0.05),显著提高了免疫后1天IgA含量;饲喂盲肠内容物显著降低鸡21天血清IgG和IgM含量,提高了血清白蛋白和7天后IgM含量(P<0.05);对免疫注射后期免疫指标没有显著影响(P>0.05)。(3)与无菌组相比,免疫注射1天后,饲喂乳酸杆菌和盲肠内容物均显著提高了鸡血清中ND抗体水(P<0.05);饲喂盲肠内容物还显著提高了免疫后14天血清中ND抗体水平;乳酸杆菌组在免疫后期与无菌组没有差异。(4)与无菌组相比,饲喂乳酸杆菌降低免疫后7天鸡十二指肠黏膜SIgA的分泌量,对空肠组织没有差异;而盲肠内容物组对空肠黏膜SIgA的分泌量增加,对十二指肠黏膜SIgA的分泌量没有显著差异(P>0.05)。上述结果表明肠道菌群和新城疫免疫共同影响着仔鸡免疫功能。