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目的：
非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)正逐渐发展成为全球最常见的慢性肝脏病变。炎症反应能促进NAFLD的发生发展。近年来，环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COx-2)与NAFLD的关系得到关注，能否利用COX-2抑制剂来治疗NAFLD成为研究热点。过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeproliferation activator receptor-γ，PPARγ)可能通过与COX-2相互作用，参与到非酒精性脂肪肝病的发病过程中，且已有研究表明部分选择性COX-2抑制剂具有激活PPARγ的作用。本文旨在探讨选择性COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis，NASH)的保护作用以及其对PPARγ的激活作用。
方法：
建立2型糖尿病大鼠NASH模型，应用选择性COX-2抑制剂进行干预治疗。实验对象分为4组:①对照组;②对照+celecoxib组;③模型组;④模型+celecoxib组。造模后收集大鼠血清和肝脏标本。利用全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平。肝组织HE染色和NAFLD活动度评分(NAFLDactivity scores，NAS)以评估肝脏脂肪性炎症程度。肝组织油红O染色以及肝内甘油三酯和胆固醇含量测定以评价肝内脂质聚集情况。分别通过免疫组织化学染色方法、Western blot方法、Real-time PCR方法检测celecoxib对COX-2、PPARγ蛋白以及mRNA表达的影响。
结果：
1、塞来昔布具有抑制肝脏炎症和脂质聚集的作用
在①至④组中，血清ALT水平分别为(33.00±4.06)U/L，(36.8±2.39)U/L，(301.80±5.40)U/L，(88.80±13.07)U/L;血清AST水平分别为(76.6±7.64)U/L,(80.2±6.42)U/L，(345.40±9.63)U/L，(99.80±20.51)U/L，统计分析表明模型组ALT和AST水平显著高于对照组(P＜0.01);模型+celecoxib组ALT和AST水平显著低于模型组(P＜0.01)。肝脏HE染色显示模型组、模型+celecoxib组均有不同程度的肝脏脂肪性炎症。①至④组NAS评分为NAS:(0.8±0.45)，(1±0.71)，(3.8±0.45)，(6.2±0.45)，统计分析表明模型+celecoxib组NAS明显弱于模型组(P＜0.01)。模型组肝内甘油三酯水平(162.79±7.05)mg/ml显著高于对照组(95.22±4.63)mg/ml(P＜0.01)、对照+celecoxib组(93.47±5.41)mg/ml(P＜0.01)、模型+celecoxib组(120.11±9.82)mg/ml(P＜0.01)。模型组肝内胆固醇水平(186.25±13.19)mg/ml显著高于对照组(73.67±4.40)mg/ml(P＜0.01)、对照+celecoxib组(75.44±4.03)mg/ml(P＜0.01)、模型+celecoxib组(114.51±10.60)mg/ml(P＜0.01)。
2、塞来昔布抑制2型糖尿病大鼠NASH肝脏中COX-2蛋白和mRNA表达
免疫组化结果表明COX-2在对照组、对照+celecoxib组、模型组、模型+celecoxib组中阳性细胞率分别为（5.74±0.23）％、（5.65±2.18）％、(53.12±0.93)％、(31.44±0.99)％;Western blot结果显示COX-2在对照组、对照+celecoxib组、模型组、模型+celecoxib组的蛋白表达倍数分别为(1.00±0.15)、(1.07±0.10)、(3.04±0.23)、(1.26±0.11); Real-time PCR结果显示COX-2在对照组、对照+celecoxib组、模型组、模型+celecoxib组的mRNA表达倍数分别为(1.14±0.32)、(1.05±0.27)、(5.11±0.53)、（2.57±0.40）;统计分析表明模型组COX-2阳性细胞率、蛋白、mRNA表达水平倍数显著高于对照组(P＜0.01)和对照+celecoxib组(P＜0.01)，celecoxib能显著抑制2型糖尿病大鼠NASH肝脏中COX-2表达(P＜0.01)。
3、塞来昔布促进2型糖尿病大鼠NASH肝脏中PPARγ蛋白和mRNA表达
Western blot结果显示PPARγ在对照组、对照+celecoxib组、模型组、模型+celecoxib组的蛋白表达倍数分别为(1.00±0.15)、(1.06±0.11)、(0.37±0.03)、(0.86±0.08); Real-time PCR结果显示PPARγ在对照组、对照+celecoxib组、模型组、模型+celecoxib组的mRNA表达倍数分别为(1.07±0.45)、(1.04±0.32)、(0.24±0.16)、(0.72±0.33);统计分析表明模型组PPARγ蛋白、mRNA表达水平倍数显著低于对照组(P＜0.01)和对照+celecoxib组(P＜0.01)，celecoxib能显著促进2型糖尿病大鼠NASH肝脏中PPARγ表达(P＜0.05)。
结论：
1、选择性COX-2抑制剂塞来昔布对2型糖尿病大鼠NASH具有保护作用。
2、塞来昔布抑制肝脏脂肪性炎症，其机制可能与抑制COX-2表达，上调PPARγ表达有关。