奶牛乳腺炎一直困扰着奶牛养殖业的发展,是造成奶业经济损失最主要的原因之一。导致奶牛乳房发生炎症的因素有很多,其最主要是由于病原微生物感染引起的。在病原微生物鉴定技术方面,分离鉴定法是应用最早也最具权威的方法,体细胞数(SCC)也被认为是反映奶牛乳房健康状况的最重要的诊断指标。近年来,多种新的病原鉴定技术应用到奶牛乳腺炎病原微生物的鉴定,同时对乳腺炎新的诊断指标的探索也从未停止。本研究对河南省内奶牛乳腺炎病原流行情况进行调查,同时应用分离鉴定法和微流控基因芯片法进行病原鉴定,然后对隐性乳腺炎乳汁进行乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分等分析,对患病牛只血液进行血常规分析,旨在探索奶牛乳腺炎病原流行情况和乳腺炎对乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分、血常规指标的影响,以期为新的诊断指标的发现提供参考。在此过程中,尝试了对应用软件的开发,旨在提高诊断效率,更好的为牧场服务。本研究主要包括以下试验和内容:研究一:河南省内奶牛乳腺炎病原流行情况调查和奶牛乳腺炎病原分子快速诊断技术的应用。参考牧场DHI报告、CMT和De Lava便携式体细胞测定仪,采集省内27家牧场185头/份乳腺炎样品,利用分离鉴定法和微流控基因芯片法进行病原菌鉴定。结果显示:检出率最高的病原是乳房链球菌(40.20%)、牛棒状杆菌(26.47%)、无乳链球菌(11.76%)、大肠杆菌(6.21%)、支原体(6.21%)等,其中乳房链球菌、牛棒状杆菌、大肠杆菌为环境性病原微生物;无乳链球菌、支原体为传染性病原微生物。结果提示:河南省内传染性病原微生物导致的奶牛乳腺炎得到控制,但仍需警惕。环境性病原微生物的高检出则需要牧场通过进一步提高饲养管理来改善。研究二:奶牛隐性乳房炎诊断指标的探索。探索了奶牛乳腺炎对乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分、血常规等指标的影响,并做和SCC的相关性分析。根据牧场DHI报告,选择月度平均SCC较高的牧场,参考CMT,利用De Lava便携式体细胞测定仪筛选SCC<50×104/m L的牛只20头,SCC>50×104/m L的牛只28头,取其乳汁和血液进行分析。研究表明:两组奶牛乳中HP、SAA、AGP、CRP含量均差异显著(P<0.01),同时乳汁中HP、SAA、AGP、CRP含量与SCC呈极显著正相关(P<0.01),相关性系数(r)分别为:HP(r=0.806)、SAA(r=0.662)、AGP(r=0.604)、CRP(r=0.717)。两组奶牛乳中LDH、MPO、NAG、CAT活性差异极显著(P<0.01),且乳汁中LDH、MPO、NAG、CAT活性与SCC呈极显著正相关(P<0.01),相关性系数(r)分别为:LDH(r=0.729)、MPO(r=0.433)、NAG(r=0.932)、CAT(r=0.430)。乳中乳糖含量在发生隐性乳腺炎前后差异极显著(P<0.01),与SCC呈极显著正相关(r=0.765,P<0.01)。不同组奶牛血液中平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)差异极显著(P<0.01),同时MCHC与SCC呈极显著正相关(r=0.413,P<0.01)。结果提示:乳汁中HP、SAA、AGP、CRP含量均有可能作为奶牛隐性乳腺炎的诊断指标;乳汁中LDH、MPO、NAG、CAT活性均有可能作为奶牛隐性乳腺炎的诊断指标。LDH、NAG活性与乳汁SCC相关性最高,但其具体诊断指示量还需进一步研究。本研究提示乳糖可以作为诊断隐性乳腺炎的参考,但还需要进一步研究。奶牛发生隐性乳腺炎前后,血常规变化的相关研究较少,MCHC是否可以作为奶牛隐性乳腺炎的指示指标还有待进一步研究。研究三:奶牛乳腺炎信息化诊断平台的研究与开发。在河南省奶牛乳腺炎病原流行情况调查过程中,为了提高乳腺炎检测报告的生成效率,故设计并开发《奶牛乳腺炎检测报告生成系统》1套。同时,为了实现奶牛主要疾病的查询和奶牛疾病的诊断,开发《奶牛专家系统》1套。研究内容:《奶牛乳腺炎检测报告生成系统》可根据输入的检测结果,自动从系统出针对性的防治建议,并自动排版生成检测报告。《奶牛专家系统》根据奶牛产奶生产过程中实际发生的疾病情况,结合相关文献信息综合形成奶牛疾病管理系统的知识库,并根据使用者输入的信息进行奶牛疾病的诊断。以上研究,旨在实现奶牛常见病诊断信息化,方便牧场相关技术人员及时、快速的确诊奶牛疾病,在服务奶农的同时,推动奶业健康发展。