【摘 要】
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[目的]通过采用Western Blot、RT-PCR和实时荧光定量PCR的方法检测CIAPIN1基因在5种结肠癌细胞株Caco-2、COLO205、HT-29、HCT116、LOVO中的表达,并与正常结肠上皮细胞NCM460
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[目的]通过采用Western Blot、RT-PCR和实时荧光定量PCR的方法检测CIAPIN1基因在5种结肠癌细胞株Caco-2、COLO205、HT-29、HCT116、LOVO中的表达,并与正常结肠上皮细胞NCM460对比,探讨CIAPIN1基因在结肠癌发生发展中所起的作用,为进一步研究结肠癌的靶向治疗及耐药逆转提供一定的理论基础。[方法]1.培养5种结肠癌细胞株Caco-2、COLO205、HT-29、HCT116和LOVO,正常结肠上皮细胞株NCM460。2.提取5种结肠癌细胞株和正常结肠上皮细胞的蛋白,采用Western Blot检测CIAPIN1基因的表达。3.提取5种结肠癌细胞株和正常结肠上皮细胞的mRNA,采用RT-PCR和实时荧光定量PCR检测CIAPIN1的表达。4.通过三种方法的检测,对结肠癌细胞株和正常结肠上皮细胞中的CIAPIN1基因的表达进行对比。[结果]1. Western Blot检测结果显示:CIAPIN1基因在正常结肠上皮细胞NCM460中不表达,而在5种结肠癌细胞中呈现相对高表达。2. RT-PCR和实时荧光定量PCR检测结果显示:CIAPIN1基因在结肠癌细胞中的表达比正常结肠上皮细胞NCM460表达增多,即呈现相对高表达。[结论]CIAPIN1基因在结肠癌细胞株中呈现相对高表达,其可能作为癌基因参与了结肠癌的发生发展。
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