藏红花素对急性淋巴细胞白血病患儿淋巴细胞功能的影响

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目的本研究旨在探讨藏红花素对急性淋巴细胞白血病患儿淋巴细胞体外增殖及功能的影响。方法采用Ficoll-Hypaque法分离8例急性淋巴细胞白血病完全缓解半年以上1、10岁儿童外周血单个核细胞,分为对照组、植物血凝素组(PHA终浓度10μ g/ml)和四个实验组,即:藏红花素终浓度分别为0.625mg/ml(A组)、1.25mg/ml(B组)2.5mg/ml(C组)、5mg/ml(D组),各实验组均加入终浓度为10μg/ml的PHA。各组终体积均为Iml。恒温箱中培养三天。噻唑兰(MTT)法检测各组淋巴细胞增殖活性变化。ELISA法检测各组上清液中白介素-2(IL-2)和白介素-4(IL-4)的水平。流式细胞术检测对照组、C组和D组中CD4+T细胞和CD8+T细胞的百分率及CD4/CD8比值。结果①藏红花素对淋巴细胞增殖指数的影响:对照组淋巴细胞增殖指数为(0.98±0.04):植物血凝素组为(1.28±0.07);实验A、B、C、D组分别为:(1.36±0.08)、(1.64±0.15)、(1.76±0.20)、(2.02±0.10);植物血凝素组,实验A、B、C、D组均明显高于对照组(F=57.775,p0.01),实验B、C、D组明显高于植物血凝素组(p0.05);各实验组间比较,随藏红花素浓度的增加,淋巴细胞增殖指数升高,差异具有显著的统计学意义(P<0.05)。植物血凝素组与实验A组比较差异无统计学意义。②IL-2浓度:对照组IL-2含量为(9.58±3.49)pg/ml;植物血凝素组为(22.01±7.04)pg/ml;实验A、 B、C、D组分别为:(24.90±7.70)pg/ml、(25.44±7.71)pg/ml、(35.93±9.41)pg/ml、(44.19±8.07)pg/ml;植物血凝索组、实验A、B、C、D组明显均高于对照组(F=28.09,P<0.01);实验C、D组高于植物血凝素组及实验A、B组(P<0.05);实验D组高于实验C组(P<0.05)。植物血凝素组与实验A、B组比较,实验A组与B组比较,差异无统计学意义。③IL-4浓度:对照组IL-4含量为(12.55±1.34)pg/ml:植物血凝素组为(18.50±0.71)pg/ml;实验A、B、C、D组分别为:(18.63±1.52)pg/ml、(24.89±1.51)pg/ml、(27.61±0.87)pg/ml、(28.67±0.86)pg/ml;植物血凝素组、实验A、B、C、D组明显高于对照组(F=338.36,P<0.01);实验B、C、D组高于植物血凝素组,实验组之间两两比较,随藏红花素浓度的增高,IL-4的浓度也增高,差异有显著性(P<0.05)。植物血凝素组与实验A组比较差异无统计学意义。④T细胞亚群的变化:对照组CD4+T细胞、CD8+T细胞百分率分别为(21.33±6.35)%、(26.77±3.67)%;C组CD4+T细胞、CD8+T细胞百分率分别为(24.70±6.60)%、(21.70±7.64)%;D组CD4+T细胞、CD8+T细胞百分率分别为(31.57±4.57)%、(18.2±6.59)%;对照组CD4/CD8比值为0.79±0.13;C组CD4/CD8比值为1.16±0.14;D组CD4/cD8比值为1.86±0.60:D组明显高于对照组(F=6.64,P均<0.05)。实验C组与对照组比较,实验D组与实验C组比较,差异无统计学意义。结论①藏红花素浓度在1.25mg/ml-Smg/ml时,体外可促进急性淋巴细胞白血病患儿外周血淋巴细胞增殖,且随藏红花素浓度的增加而增强。②藏红花素浓度在2.5mg/ml和5mg/ml时能促进T细胞分泌细胞因子IL一2,浓度为5mg/ml作用更明显;藏红花素浓度在1.25mg/ml~5mg/ml时能促进T细胞释放细胞因子IL-4,且随藏红花素浓度的增加而增强。③藏红花素浓度在5mg/ml时,可使体外培养的淋巴细胞CD4/CD8比值升高。
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