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目的研究靶向沉默ADAM17基因对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法1应用慢病毒转染技术,将整合有ADAM17基因的小干扰RNA（ADAM17-shRNA）导入人甲状腺乳头状癌K1细胞,从而靶向沉默ADAM17基因;设置病毒与细胞数量比（MOI值）梯度:30、40、50、60、70、80、90、100,慢病毒携有红色荧光蛋白框架,在荧光显微镜下观察K1细胞红色荧光蛋白表达率,从而摸索出转染效率能达80%的最佳MOI值。2实验分为空白对照组、无意义序列组、转染组,转染组K1细胞按照已摸索的MOI值,加入整合有ADAM17-shRNA的慢病毒载体,无意义序列组K1细胞按照相同MOI值,加入整合有无意义序列的shRNA的慢病毒载体,空白组K1细胞加入与上述等量磷酸盐缓冲液。3采用Real time-PCR方法检测各组K1细胞ADAM17 mRNA相对表达量、Western blot法测定ADAM17蛋白相对表达量,从而在mRNA及蛋白水平检验基因沉默效率。4采用MTT法和流式细胞仪测定细胞周期评估各组K1细胞的增殖能力;分别用Transwell迁移、侵袭实验观察各组K1细胞的迁移及侵袭能力。结果1当MOI值取80时,K1细胞红色荧光蛋白表达率达80%,慢病毒载体成功转染K1细胞,并获得稳定表达。2由2-ΔΔCT分析法计算ADAM17 mRNA相对表达量,空白对照组（1.000±0.000）、无意义序列组（1.064±0.156）、转染组（0.082±0.017）,空白对照组和无意义序列组之间无显著差异（P>0.05）,转染组的ADAM17 mRNA表达量显著降低（P<0.05）;ADAM17蛋白表达量空白对照组（0.868±0.183）、无意义序列组（0.841±0.332）、转染组（0.267±0.066）,空白对照组和无意义序列组差异无统计学意义（P>0.05）,转染组的ADAM17蛋白表达量显著降低（P<0.05）,转染组K1细胞ADAM17基因的表达受到显著抑制,ADAM17基因被成功沉默。3 MTT法测定空白对照组、无意义序列组、转染组K1细胞在转染成功后24 h、48 h、72 h时间点的吸光度（OD值）分别为24 h（0.431±0.041、0.444±0.050、0.307±0.030）,48 h（0.745±0.028、0.788±0.019、0.450±0.041）,72 h（1.229±0.059、1.255±0.067、0.681±0.036）,转染组各时间点OD值均较空白对照组和无意义序列组低（P均<0.05）,空白对照组与无意义序列组之间无显著差异（P均>0.05）;流式细胞仪测定各组处于G0/G1期的细胞比例,空白对照组（35.16±1.59）%、无意义序列组（32.27±2.42）%、转染组（51.17±2.14）%,转染组高于空白对照组和无意义序列组（P<0.05）,出现了明显的G0/G1期阻滞,空白对照组和无意义序列组差异无统计学意义（P>0.05）。Transwell迁移实验单个视野（100倍镜）穿膜细胞数,空白对照组（422.800±24.108）、无意义序列组（432.600±25.550）、转染组（149.20±20.753）,转染组少于空白对照组和无意义序列组（P<0.05）,空白对照组和无意义序列组无显著差异（P>0.05）;Transwell侵袭实验单个视野（100倍镜）穿膜细胞数,空白对照组（216.400±13.088）、无意义序列组（211.800±18.363）、转染组（83.800±11.903）,转染组少于空白对照组和无意义序列组（P<0.05）,空白对照组和无意义序列组差异无统计学意义（P>0.05）。结论ADAM17-shRNA可成功沉默甲状腺乳头状癌K1细胞的ADAM17基因;敲除ADAM17基因可抑制K1细胞的增殖、迁移和侵袭;ADAM17基因可能是甲状腺乳头状癌基因治疗的新靶点。