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背景:化学疗法是目前治疗鼻咽癌、喉癌的重要手段之一。大剂量的化疗药物在杀灭肿瘤细胞的同时,对机体组织可造成骨髓抑制、肝脏损害等相当严重的毒副作用,大大降低了肿瘤患者的生存质量。寻找既高效杀灭肿瘤细胞,又能降低其毒副作用的药物是现代肿瘤治疗的热点。已有研究报道,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)在杀灭肿瘤细胞的同时对正常细胞无明显毒副作用,且联合低毒性的化疗药物能高效诱导肿瘤细胞的凋亡,有望成为一种新型抗肿瘤药物。但它对人喉表皮癌细胞株(Human epidermal carcinoma cell line,HEP-2)、人鼻咽癌细胞株(Human nasopharyngeal carcinoma cell line,HNE-1)的研究报道甚少。本文旨在研究TRAIL联合5氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)对HEP-2、HNE-1细胞株增殖和凋亡的影响,并探讨了其可能的机制。目的:观察不同浓度的TRAIL、化疗药物(5-FU、DDP)分别和联合对HNE-1、HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响并探讨其可能机制。方法:1采用MTT检测不同浓度的TRAIL(1.0,10.0,100.0,1000.0ng/ml);DDP(1.0,10.0,100.0μg/ml);5-FU(1.0,10.0,100.0μg/ml)对HEP-2、HNE-1细胞株的增殖抑制作用。依据结果将实验分组为5组即空白对照组(无药物);TRAIL(10.0ng/ml)处理组;DDP(1.0μg/ml)处理组;5-FU(1.0μg/ml)处理组;DDP(1.0μg/ ml)+TRAIL(10.0ng/ml)处理组;5-FU(1.0μg/ml)+TRAIL(10.0ng/ml)处理组进行以下实验。2采用MTT法检测不同处理组分别对HNE-1和HEP-2增殖抑制的影响。3采用FCM法检测AnnexinⅤ-FITC/PI双染色细胞后不同处理组细胞的凋亡,荧光显微镜下观察细胞形态。4采用Western-blot法检测不同处理组细胞中细胞型Fas相关死亡域样白介素1β转换酶抑制蛋白(Celluar Fas-ssociated death domain-like IL-1 beta converting enzyme inhibitory protein,c-FLIP)、核转录因子кB (Nuclear factorsкB,NF-кB)的表达情况。结果:1 TRAIL联合5-FU、DDP对HEP-2细胞株的研究:1)浓度为1.0μg/ml的5-FU、DDP可以抑制HEP-2细胞株的增殖,1.0ng/ml的TRAIL不能抑制HEP-2细胞株的增殖,10.0ng/ml以上浓度的TRAIL可抑制HEP-2细胞株的增殖。选取药物浓度为5-FU1.0μg/ml,DDP1.0μg/ml,TRAIL10.0ng/ml进行进一步的实验。2)DDP+TRAIL处理组HEP-2细胞株抑制率为(33.69±3.50)%,与TRAIL处理组(5.73±4.31)%和DDP处理组(15.06±8.83)%相比,HEP-2细胞株抑制率明显提高,差异具有统计学意义。3)5-FU+TRAIL处理组HEP-2细胞株抑制率为(29.21±9.80)%,与TRAIL处理组(5.73±4.31)%和5-FU处理组(12.68±5.20)%相比,HEP-2细胞株抑制率明显提高,差异具有统计学意义。4)DDP+TRAIL处理组HEP-2细胞株凋亡率为(24.76±1.20)%,与TRAIL处理组(0.24±0.023)%和DDP处理组(14.70±2.21)%相比,HEP-2细胞株凋亡率明显提高,差异具统计学意义。5)5-FU+TRAIL处理组HEP-2细胞株凋亡率为(14.33±0.78)%,与TRAIL处理组(0.24±0.023)%和5-FU处理组(2.25±0.56)%相比,HEP-2细胞株凋亡率明显提高,差异具统计学意义。6)TRAIL处理组、5-FU处理组、DDP处理组中c-FLIP、NF- B蛋白的表达水平高于TRAIL+5-FU处理组和TRAIL+DDP处理组。2 TRAIL联合5-FU、DDP对HNE-1细胞株的研究:1)浓度为1.0μg/L的5-FU、DDP可以抑制HNE-1细胞株的增殖,1.0ng/ml的TRAIL不能抑制HNE-1细胞株的增殖,10.0ng/ml以上浓度的TRAIL可抑制HNE-1细胞株的增殖。选取药物浓度为5-FU1.0μg/ml,DDP1.0μg /ml,TRAIL10.0ng/ml进行进一步的实验。2)DDP+TRAIL处理组HNE-1细胞株抑制率为(38.61±7.56)%,与TRAIL处理组(5.73±4.42)%和DDP处理组(14.62±7.92)%相比,HNE-1细胞株抑制率明显提高,差异具有统计学意义。3)5-FU+TRAIL处理组HNE-1细胞株抑制率为(31.89±5.61)%,与TRAIL处理组(5.73±4.42)%和5-FU处理组(14.17±9.6)%相比,HNE-1细胞株抑制率明显提高,差异具有统计学意义。4)DDP+TRAIL处理组HNE-1细胞株凋亡率为(14.72±1.20)%,与TRAIL处理组(0.66±0.23)%和DDP处理组(2.19±0.52)%相比,HNE-1细胞株凋亡率明显提高,差异具统计学意义。5)5-FU+TRAIL处理组HNE-1细胞株凋亡率为(14.70±1.78)%,与TRAIL处理组(0.66±0.23)%和5-FU处理组(2.43±0.26)%相比,HNE-1细胞株凋亡率明显提高,差异具统计学意义。6)TRAIL处理组、5-FU处理组、DDP处理组中c-FLIP、NF-κB蛋白的表达水平高于TRAIL+5-FU处理组和TRAIL+DDP处理组。结论:1 TRAIL能诱导HEP-2、HNE-1细胞株的增殖,且与5-FU、DDP联合应用具协同抑制细胞株增殖的作用;2 TRAIL能诱导HEP-2、HNE-1细胞株的凋亡,且与5-FU、DDP联合应用能协同诱导HEP-2、HNE-1细胞株的凋亡;3在TRAIL联合化疗药物诱导HEP-2、HNE-1细胞株凋亡的过程中,可通过下调c-FLIP、NF-κB蛋白的表达,诱导细胞株的凋亡。