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目的:观察体外培养大鼠视网膜Müller细胞在高糖条件下细胞活性、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP)的变化，研究左卡尼汀(L-carnitine，LC)对其作用的影响，探讨LC对Müller细胞的保护作用及机制。
方法:取出生1-3天SD大鼠视网膜，反复胰酶消化法纯化Müller细胞，进行GS、GFAP单标及双标免疫荧光鉴定。用台盼蓝染色法观察不同浓度葡萄糖对Müller细胞生长状态及存活率的影响，确立高糖浓度。将Müller细胞随机分为正常对照组、高糖组和不同浓度LC处理组，LC处理组在高糖培养液中分别加入终浓度为50、100、200umol/L LC。MTT法检测细胞活性，Hoechst33342染核检测细胞凋亡，流式细胞仪检测细胞内ROS和MMP的变化。
结果:免疫荧光显示，体外培养的细胞大部分抗GS、GFAP抗体反应阳性，该方法培养的Müller细胞纯度可达90％以上。MTT结果显示，高糖培养组细胞活性显著下降（P＜0.05），LC处理后细胞活性上调，以100umol/L LC作用最佳。ROS检测结果显示，高糖损伤后细胞内ROS水平明显高于正常对照组（P＜0.05），Lc处理后，ROS值均低于高糖培养组(P＜0.05)。MMP检测结果显示，高糖损伤12h后，细胞MMP较正常对照组显著下降(P＜0.05)，Lc处理后，MMP均高于高糖培养组(P＜0.05)。
结论:改进的酶消化法是一种简便有效的纯化培养视网膜Müller细胞的方法;高糖条件下视网膜Müller细胞ROS生成增多，MMP下降;LC对高糖所致的视网膜Müller细胞损伤具有保护作用，其机制之一，可能是减少ROS的生成，稳定线粒体膜电位，抑制细胞的凋亡。