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目的:通过建立慢性心衰(CHF)大鼠模型,观察益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶特异性抑制物-1(TIMP-1)的影响。从基因、蛋白和组织形态学等方面展开研究,以明确益气活血复方抑制心室重构的机理,探讨益气活血复方对慢性心衰的作用机理和靶点,为中医药防治慢性心衰提供科学依据。材料与方法:1.以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,后经多普勒超声心动图检测左心室射血分数(EF)≤60%,且观察大鼠状态,判定慢性心衰大鼠动物模型造模是否成功。2.对造模成功的动物模型分为中药组、西药组、模型组,并设立空白对照组。空白对照组和模型组大鼠不用药物,常规等容积灌胃蒸馏水,各用药组模型大鼠按人鼠剂量公式换算用药剂量,中药组9.2g生药/Kg/d;赖诺普利西药组1.5mg生药/Kg/d。给药6周后麻醉处死全部大鼠,取其大鼠心脏心肌组织,待检。3.利用蛋白印迹方法、实时荧光定量PCR技术和HE染色方法与免疫组化法光镜下观察,比较中药组、西药组、空白对照组、模型组等各组间慢性心衰大鼠心肌MMP-1、TIMP-1的变化情况及心肌组织形态学变化情况。结果:1.慢性心衰动物模型组MMP-1 mRNA表达明显升高,是空白对照组的2.671倍(与空白对照组比较P<0.01);经药物干预后各治疗组MMP-1 mRNA明显下降,中药组效果最为明显,是空白对照组的1.420倍(与模型组比较P<0.01);西药组是空白对照组的1.555倍(与模型组比较P<0.01),中药组与西药组相比P<0.05,有统计学意义。2.慢性心衰动物模型组MMP-1蛋白表达明显升高,为180.232±3.047(与空白对照组比较P<0.01);经药物干预后各治疗组MMP-1蛋白表达明显下降,西药组效果最为明显,为83.197±4.919(与模型组比较P<0.01);中药组为90.387±6.606(与模型组比较P<0.01),西药组与中药组比较P<0.05,有统计学意义。3.慢性心衰模型组Timp-1 mRNA表达明显降低,是空白对照组的0.743倍(与空白对照组比较P<0.01);经药物干预后各治疗组Timp-1 mRNA明显升高,其中药组效果最为明显,为空白对照组的1.846倍(与模型组比较P<0.01,与空白对照组比较P<0.01);西药组为空白对照组的1.518倍(与模型组比较P<0.01,与空白对照组比较P<0.01),西药组与中药组比较P<0.05,有统计学意义。4.慢性心衰模型组Timp-1蛋白表达明显降低,为73.543±3.140(与空白对照组比较P<0.01);经药物干预后各治疗组Timp-1蛋白表达明显升高,中药组效果最为明显,为153.817±12.178(与模型组比较P<0.01);西药组为142.248±10.862(与模型组比较P<0.01),中药组与西药组相比P<0.05,有统计学意义。5.空白对照组心肌细胞排列规整,横纹清晰,心肌细胞形态、大小正常,肌原纤维排列有序。模型组心肌细胞交织成网,看不到横纹,肌原纤维排列紊乱,出现空白区,异染色质呈现团块状,相邻细胞闰盘间隙增宽。中药组心肌细胞排列较规整,可见到横纹,心肌细胞核较为固缩成圆形,位于心肌细胞边缘,肌原纤维排列较有序,仍可见有断裂及缺损及空白区。西药组心肌细胞排列较规整,大部分心肌细胞核位于心肌细胞边缘,形态、大小基本正常,肌原纤维排列较有序。6.慢性心衰模型组MMP-1利用免疫组化法,经软件分析后模型组其平均灰度值为550.14±132.83(与空白对照组比较P<0.01);西药组效果最为明显为114.72±46.26(与模型组比较P<0.01);中药组为124.98±30.40(与模型组比较P<0.01),中药组与西药组相比P>0.05,无统计学意义。7.慢性心衰模型组Timp-1利用免疫组化法,经软件分析后模型组其平均灰度值为115.83±43.25(与空白对照组比较P<0.01);西药组为181.16±55.34(与模型组比较P<0.01);中药组为172.94±48.75(与模型组比较P<0.01),中药组与西药组相比P>0.05,无统计学意义;正常组与中药组、西药组相比P<0.05,有统计学意义,且治疗组优于正常组。结论:1.冠状动脉结扎法结合饥饿减食与力竭式游泳,通过超声心动图检测与大鼠行为学变化,证明本次慢性心衰造模成功。2.益气活血复方通过6周治疗后利用实时荧光定量PCR、Western blot、HE染色法及免疫组化法检测大鼠心肌组织,发现益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织中MMP-1相对模型组有抑制其表达的作用;益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织中Timp-1相对模型组有明显升高其表达的作用;益气活血复方可抑制或逆转心室重构的过程。3.通过上述数据可以证明益气活血复方对治疗慢性心衰是安全有效的,相对西药赖诺普利治疗效果更加明显。4.慢性心衰的中医病因为心病久延,导致气血阴阳受损,各脏腑功能失调,为血脉通行受阻、水饮内停,瘀血停滞所致。本病的病机关键是心阳虚,益气温阳、健脾利水、活血化瘀为本病治疗三大法则。