【摘 要】
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目的:探讨复制缺陷型腺病毒携带多基因(p53,B7-1和GM-CSF)对喉鳞癌细胞生长的抑制作用.方法:①体外培养人喉鳞癌组织,建立两株喉鳞癌细胞系(LSC-1及L-17),从细胞形态学、细胞
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目的:探讨复制缺陷型腺病毒携带多基因(p53,B7-1和GM-CSF)对喉鳞癌细胞生长的抑制作用.方法:①体外培养人喉鳞癌组织,建立两株喉鳞癌细胞系(LSC-1及L-17),从细胞形态学、细胞生长特性及细胞周期、染色体核型、裸鼠成瘤实验等方面鉴定细胞的生物学特性.②在体外,利用多基因联合(p53,GM-CSF,B7-1)重组的复制缺陷腺病毒载体BB-102感染三个喉鳞癌细胞系(Hep-2、LSC-1及L-17),48小时后用免疫组化,流式细胞术,ELISA等检测目的基因是否表达蛋白.对照组设计:以每次给予等量维持细胞生长的DMEM作空白对照;以相同MOI的Ad-GFP作阴性对照;比较p53蛋白表达时,以相同MOI的Ad-p53做阳性对照.③用扫描电镜和TUNEL法检测细胞的原位凋亡,外周血淋巴细胞毒性试验观察其对喉癌细胞免疫杀伤,MTT法观察其对喉癌细胞生长的抑制.对照组设计同上.④建立裸鼠荷瘤模型,采用瘤体内局部多点注射给药,每隔5天重复注射,一共注射四次,比较给药前后的肿瘤体积变化.对照组设计同上.结论:BB-102感染喉癌细胞后,体内外试验显示目的基因都得到有效表达,肿瘤细胞出现凋亡,生长受到明显抑制,这表明多基因联合重组腺病毒治疗喉癌的方案是可行的,为今后多基因治疗恶性肿瘤作了有益探索.
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