贵金属纳米粒子化学发光体系检测药物的研究

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化学发光(Chemiluminescence,简称为CL)分析法是利用被检测物浓度与发光强度二者之间的线性关系来确定被测组分含量的光分析方法。其灵敏度高、检测速度快、操作简便等优点使其在生物、医药、临床、环境等领域倍受青睐。近年来,随着高催化活性的贵金属纳米粒子的开发利用,化学发光分析法迎来了新的发展契机。将贵金属纳米粒子引入经典化学发光反应体系,大大拓宽了化学发光分析法在药物复杂分析体系中的应用范围。本论文包括两部分,第一部分为综述,主要介绍了贵金属纳米粒子的基本概念、基本特性、制备方法及在液相化学发光体系中的应用进展。第二部分为研究报告,将贵金属纳米粒子Au、Ag引入Luminol-K3Fe(CN)6、Luminol-H2O2、Ce(Ⅳ)-Na2SO3等液相化学发光体系,在采用曲面优化法优化了各检测参数的基础上,建立了左旋咪唑、原花青素、米非司酮、左炔诺孕酮等药物的化学发光检测新方法,并应用于牛奶、药剂、血样、尿样等生物样品的分析。同时对可能的化学发光机理进行了探讨。具体内容如下:1.在金纳米粒子增敏的Luminol-K3Fe(CN)6化学发光体系中,加入左旋咪唑,体系的化学发光强度会受到很强的抑制,在利用单因素法和曲面优化法对各实验参数进行了优化的基础上,结合流动注射分析技术,提出了一种用化学发光法检测左旋咪唑的新方法。在最佳实验条件下,左旋咪唑的化学发光强度与其浓度在2.5×10-6g/L~1.0×10-3g/L范围内呈良好的线性关系,此方法的检出限为2.0×10-7g/L(3σ),RSD为2.9%(n=11,5.0×10-5g/L)。将该方法用于牛奶中左旋咪唑残留的检测,回收率为97.2%~102.5%。2.碱性条件下,米非司酮会抑制AgNPs-Luminol-H2O2化学发光体系的化学发光强度,采用响应曲面优化法消除了各因素之间的交互作用对检测结果的影响,并结合流动注射分析技术,建立了测定米非司酮的化学发光法方法。米非司酮的化学发光强度与其浓度在1.0×10-7g/mL~1.0×10-4g/mL范围内呈良好的线性关系,检出限为3.0×10-8g/mL (3σ),低于血浆中最低检测量2.0×10-7g/mL,RSD为2.6%(n=11,8.0×10-6g/mL)。该法已用于药物制剂及人血清中米非司酮的检测,回收率为97.1%~110.0%。3.在NaOH介质中,纳米银能增强Luminol-H2O2化学发光体系的发光强度,而原花青素对这个体系有很强的抑制作用。据此,建立了痕量检测原花青素的新方法。其线性范围为2.0×10-6g/L~2.0×10-2g/L,检出限为4.4×10-7g/L (3σ),低于文献报道的6.0×10-5g/L,RSD为2.1%(n=11,C=2.0×10-5g/L)。该方法用于胶囊制剂中原青花素的检测,回收率为98.0%~103.7%。4.酸性介质中,基于左炔诺孕酮对AgNPs-Ce(Ⅳ)-Na2SO3化学发光体系显著的增敏作用,结合流动注射分析技术,建立了检测左炔诺孕酮的新方法,并通过荧光光谱和紫外可见光谱探讨了该体系可能的反应机理。在最优实验条件下,其线性范围为7.5×10-7g/L~1.0×10-3g/L,检出限为6.17×10-8g/L(3σ),低于文献报道的2.5×10-6g/L,对7.5×10-5g/L的左炔诺孕酮进行11次平行测定,RSD为2.3%。此法用于人体尿样中左炔诺孕酮的测定,回收率为98.7%~103.0%。
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