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目的:分别探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体(peroxisomeproliferater-activated receptors,PPAR)α的配体对人单核细胞及内皮细胞表达组织因子(tissue factor,TF)、纤溶酶原激活抑制物-1(plasminogen activatorinhibitor type-1,PAI-1)的影响及机制,并揭示其对细胞黏附以及增殖的影响,同时初步探讨ERK信号途径在PPARα配体对单核细胞表达TF作用中的影响,从而有助于解释PPARα配体对动脉粥样硬化的影响机制。方法:1.实验中单核细胞分为两组:对照组和处理组。处理组包括:非诺贝特组、WYl4643组。PPARα配体(非诺贝特、WYl4643)预处理细胞后,用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激单核细胞,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chainreaction,RT-PCR)测定细胞中TF的mRNA表达,免疫印迹法(westemblot)检测各组细胞TF的蛋白表达,免疫细胞化学方法检测TF在单核细胞膜表面的表达。2.内皮细胞分组同上,不经LPS刺激。不同浓度的PPARα配体处理内皮细胞24h,RT-PCR检测组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,tPA)以及纤溶酶原激活抑制物-1(plasminogen activator inhibior-1,PAI-1)的mRNA水平,ELISA法检测内皮细胞的tPA、PAI-1抗原表达量,Westernblot法检测PAI-1蛋白表达水平。3.各实验组分别经LPS作用后,用噻唑蓝(MTT实验检测单核细胞及内皮细胞增殖活力。4.分离人外周血单核细胞,同样分对照及处理组与ECV304细胞株进行细胞黏附试验,观察单核细胞与内皮细胞的细胞黏附力变化。5.分别用非诺贝特、WY14643预处理单核细胞,再用LPS刺激实验组细胞,Westernblot检测磷酸化ERK1/2的表达变化。结果:1.两种PPARα配体均可以减少LPS诱导的单核细胞TF表达,并呈现浓度依赖性;2.WY14643和非诺贝特可以抑制内皮细胞PAI-1的表达,并呈现浓度依赖性。但是对tPA的表达无显著影响;3.PPAR α配体可以抑制单核细胞的增殖,同时却阻止了LPS引起的内皮细胞死亡;4.PPAR α配体作用于细胞后,脂多糖引起的单核细胞与内皮细胞的黏附率上升趋势受到抑制。5.非诺贝特和WY14643预处理细胞后,磷酸化ERK1/2蛋白表达量降低。结论:1.PPAR配体可以从多方面抑制动脉粥样硬化及血栓形成。2.这种抗病机制可能涉及以下几方面:抑制单核细胞表面膜蛋白——TF的表达;减少内皮细胞PAI-1的表达;抑制炎性刺激所致的单核细胞增殖,对内皮细胞具有细胞保护作用;抑制脂多糖引起的单核细胞与内皮细胞的黏附。3.PPAR α配体对TF的影响作用可能是通过阻止ERK1/2的激活来实现。