三氯乙烯致敏豚鼠体液免疫改变及其与肝损伤的关系

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shayuer
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究背景三氯乙烯(TCE)是一种有机溶剂,在工业上作为脱脂、清洗和去污剂应用广泛。职业暴露TCE的工人出现三氯乙烯药疹样皮炎(DMLT)伴肝功能损伤已经成为国内目前主要的职业卫生问题,近几年关于皮肤损伤的机制研究较多,多认为是迟发型变态反应。DMLT患者往往伴有严重的肝损伤,继发的肝、肾多脏器损伤往往是DMLT患者死亡的直接原因,但是目前关于肝损伤的机制研究较少,现有的免疫和遗传多态性等机制不足以解释DMLT伴发的肝损伤。近年,国内学者对DMLT患者进行研究时也发现患者出现肝细胞水肿和包括补体(Complement,C)在内的免疫性指标异常,提示在DMLT患者出现的肝功能损伤发生过程中除了IV型变态反应参与外,可能还有其他的免疫机制参与。研究目的根据不同组别及时点豚鼠血清中IgA、IgG、IgM、C3、C4、IgA/C3-CIC、IgG/C3-CIC和IgM/C3-CIC的表达水平,结合肝功能检查、病理学检查和超微结构检查,探讨TCE致敏豚鼠体液免疫改变及其与肝损伤的关系。研究方法选用体重250~300g/只,白色雌性豚鼠,经适应性饲养一星期后,随机分成空白对照组、溶剂对照组(橄榄油)、TCE组。采用豚鼠最大值试验(Guinea Pig Maximization Test, GPMT)方法建立豚鼠致敏模型,观察并记录豚鼠背部受试区的皮肤反应情况并进行拍照;依据《化学品毒性鉴定技术规范》(卫监督发【2005】272号)中规定的皮肤反应评分标准对豚鼠皮肤反应进行评分;当受试样品组动物皮肤反应积分≥1时,为皮肤致敏反应阳性,该动物被划分为致敏组,反之被划分为未致敏组。另外在末次激发前一天随机选取5只动物作为TCE14d组,采血并处死动物,无菌取肝组织。分别在末次激发后24h和72h分两批抽取豚鼠血液制备血清,用于检测免疫球蛋白IgA、IgG、IgM,肝功能,补体C3、C4和循环免疫复合物IgA/C3-CIC、IgG/C3-CIC、IgM/C3-CIC;并处死动物,无菌取肝脏,一部分放入20ml 10%福尔马林中固定后,常规制成切片进行病理学检查;另一部分肝脏用0.1mol/l戊二醛-多聚甲醛混合缓冲固定液(Karno)固定8~10 h后,用系列乙醇脱水,最后用环氧树脂(EPON812)包埋,制成超薄切片,用透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构并摄片;用SPSS13.0统计软件包对实验结果进行统计分析。结果1.致敏率在皮肤致敏反应试验中,空白组、溶剂对照组和TCE14d组均未见红斑或水肿,在TCE试验组的26只动物中有17只出现红斑水肿,致敏率为65.38%。2. IgA检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgA水平均明显降低(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。在激发后24h和72h时点,TCE致敏组与未致敏组相比,血清中IgA水平降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgA水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与TCE致敏24h组相比,TCE致敏72h组的血清中IgA水平明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。3. IgG检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgG水平均降低,但差异无统计学意义(p>0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。在激发后24h和72h时点,TCE致敏组与未致敏组相比,血清中IgG水平降低,差异无统计学意义(p>0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组24h和72h两个时点的血清中IgG水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。4. IgM检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgM水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏24h、72h组和TCE未致敏72h组的血清中IgM水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。5. C3检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏24h、72h组和TCE未致敏72h组的水平均明显降低(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。在激发后72h时点,TCE致敏组与未致敏组相比,血清中C3水平降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与TCE致敏24h组相比,TCE致敏72h组的水平明显降低(p<0.05)。6. C4检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中C4水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中C4水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与TCE致敏24h组相比,TCE致敏72h组的血清中C4水平略有降低,但差异无统计学意义(p>0.05)。7. IgA/C3-CIC检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgA/C3-CIC水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgA/C3-CIC水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与TCE致敏24h组相比,TCE致敏72h组血清中IgA/C3-CIC水平明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。8. IgG/C3-CIC检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgG/C3-CIC水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgG/C3-CIC水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。9. IgM/C3-CIC检测结果溶剂对照组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgM/C3-CIC水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。TCE14d组与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。与TCE14d组相比,TCE致敏组和TCE未致敏组的血清中IgM/C3-CIC水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。10.肝功能检查结果溶剂对照组肝功能各指标与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05);TCE致敏组ALT水平与溶剂对照组相比升高,差异有统计学意义(p<0.05);而TCE未致敏组ALT水平与溶剂对照组相比有升高,但差异无统计学意义(p>0.05);TCE致敏动物末次激发后72h动物的ALT和AST水平比激发后24h的明显升高,差异有统计学意义(p<0.05);在72h的时点,致敏组比未致敏组ALT和AST水平也明显升高,差异有统计学意义(p<0.05);TCE致敏72h组ALB水平比溶剂对照组、TCE14d组和TCE未致敏72h组降低(p<0.05)。11.病理学检查结果空白对照组、溶剂对照组豚鼠肝细胞排列整齐,胞质均匀,胞核大而圆,核仁明显,核膜清晰;TCE未致敏组有一部分豚鼠肝脏能见到肝细胞水肿;TCE致敏组几乎所有动物都有肝细胞的水肿,但末次激发后24h水肿程度轻微,而末次激发后72h动物能见到较多大量肝细胞水肿,并有胞核破裂消失。12.超微结构检查结果空白对照组和溶剂对照组肝脏结构未见明显异常;TCE未致敏组可见少数线粒体空泡、变性,粗面内质网减少;TCE致敏组肝脏细胞中线粒体数量减少、空泡、变性,粗面内质网断裂、扩张,糖原颗粒明显减少,且在末次激发后72h组比24h组的损害更严重。13.血清中C3与循环免疫复合物以及肝功能与补体、循环免疫复合物之间相关性分析C3与IgA/C3-CIC、IgG/C3-CIC、IgM/C3-CIC存在显著正相关;ALT、AST与C3、C4、IgA/C3-CIC、IgG/C3-CIC、IgM/C3-CIC之间存在显著负相关。结论1.采用豚鼠最大值试验可以建立TCE致敏模型,本实验条件下,TCE致敏率为65.38%。2. TCE致敏组豚鼠体内免疫功能紊乱,补体系统被激活。3. TCE暴露可造成豚鼠肝功能损伤和肝细胞的病理及超微结构的损伤,损伤程度随时间进行而加重。4. TCE致敏豚鼠体内肝损伤与体液免疫的改变可能有一定的联系。
其他文献
玉米缺锌致使玉米叶脉变白、叶干而死,称“干叶病”,严重影响玉米产量。近年来,虽然复种指数不断提高,但在一些缺锌地区尚未把施锌列入施肥制,造成作物产量下降。锌素在植物
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
经济快速发展与资本市场相对滞后的矛盾是我国经济发展过程中面临的一大问题。最近,国务院出台了《国务院关于推进资本市场改革和稳定发展的若干意见》(以下简称国务院《意见
冬小麦是我县主要粮食作物,对全县粮食生产影响很大。为了把冬小麦种足种好,提高越冬率,实现丰收,根据我县冬麦生产情况和我所近年试验结果,提出如下几项播种和冬前、冬季田
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
本试验里对春麦杂种后代抽穗期的变异进行了初步的观察与研究。结果证明,双亲与杂种 F_1代的相关系数为0.8655,与 F_2代的相关系数为0.8890,均表现极显著地高度正相关。据四
我省属大陆性季风气候区,春季风大少雨,十年九春旱,给农业生产带来很大不利因素,特别是春旱对农业生产威胁很大。它不仅会影响一次播种保全苗,而且还会由于拖迟播期和出苗期
通过远缘杂交,将野生种的某些优良性状转移到栽培种中,以提高育成品种的抗逆力和丰产性,已成为小麦育种中一项新的途径。为了解决天水地区锈病和干旱对小麦生产的严重威胁,
目的:1、根据项目实施程序及效果建立一套针对项目实施状况的评估指标体系。2、在指标体系的基础上建立综合评价模型。3、利用综合评价模型对项目实施省份进行实证研究,为项目