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目的对比观察重度烧伤大鼠补充不同剂量(50mg/kg、100mg/kg (?)口200mg／kg)核黄素后其全血红细胞谷胱甘肽还原酶活性系数(EGRAC)及血清总抗氧化能力(T-AOC)的变化、对创面胶原沉积的病理学的影响,探讨重度烧伤大鼠伤后核黄素的适宜补充剂量,为深入研究烧伤患者核黄素的适宜补充剂量提供科学依据。方法1.建立Wistar大鼠III度烧伤模型64只成年雄性Wistar大鼠,6-8周龄,体重在150-180g范围内,给每只大鼠腹腔内注射5%水合氯醛(250mg/kg)麻醉,麻醉后背部用4%硫化钠褪毛。第2天再次麻醉后,将背部脱毛区置于100℃水中15秒,造成背部10%TBSAⅢ度烫伤(经病理切片证实,以下称烧伤)。烧伤后立即经腹腔注射补充等渗盐水(4ml／100g体重)抗休克,创面用凉纱布覆盖。单笼喂养,自由进食。2.实验动物的分组烧伤Wistar大鼠64只,随机分为治疗组I16只、治疗组II16只、治疗组III16只及对照组16只。伤后2小时开始予以核黄素。治疗组大鼠分别经灌胃予以不同剂量核黄素：治疗组Ⅰ50mg/kg,治疗组II100mg/kg,治疗组III200mg／kg。核黄素每日补充1次,连续2周。对照组大鼠烧伤后不予注射核黄素。3.观察指标1)全血红细胞谷胱甘肽还原酶活性系数(EGRAC)及血清总抗氧化能力(T-AOC)治疗组和对照组大鼠分别于烧伤后第1天、3天、7天和14天采集大鼠尾血,使用BECKMANLX20全自动生化分析仪测定红细胞谷胱甘肽还原酶活性系数(EGRAC),用721分光光度计测定血清总抗氧化能力(T-AOC)。2)组织学检查于伤后7天每组随机处死半数大鼠,切取部分创面组织块,制作石蜡包埋切片,行HE染色进行光镜组织学观察。光镜下观察每例切片随机选择5个高倍视野(HE,10×40),分别观察每一高倍镜视野的成纤维细胞数量,炎症反应程度(以炎细胞数量及炎性坏死渗出综合考虑),表皮细胞生长情况及胶原纤维情况。伤后14天处死剩余大鼠,以同样方处理。3)烧伤创面羟脯氨酸(HOP)含量检测取上述创面组织块,采用化学比色法测定创面HOP含量的变化,观察创面修复过程中胶原蛋白含量的变化。4.统计方法采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。所有计量资料均己均数±标准差(x±s)表示,同组间不同时间的均数比较采用方差分析,不同组间相同时间的均数比较采用方差分析,组间差异采用配对q检验分析；计数资料比较采用卡方检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果1.全血红细胞谷胱甘肽还原酶活性系数(EGRAC)及血清总抗氧化能力(T-AOC)测定治疗组予以补充核黄素后,相同时间段内出现的核黄素缺乏的例数均明显较对照组少,血清总抗氧化能力比对照组明显增强,差异均具有统计学意义(P<0.05)。伤后7-14天,治疗组II与治疗组III大鼠核黄素缺乏及血清总抗氧化能力的改善情况均优于治疗组I,差异均具有统计学意义(P<0.05)；治疗组III与治疗组II大鼠相比较,核黄素缺乏及血清总抗氧化能力的改善情况不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。2.组织学检查伤后第7天、第14天,各组创面均表现为急慢性炎症反应,3个治疗组成纤维细胞数和新生表皮层数较对照组少,差别显著,差异有统计学意义(P<0.05)；治疗组III明显高于治疗组I与治疗组II,治疗组I与治疗组II间无明显差异。创面H—E染色显示伤后治疗组III炎症反应较治疗组I、治疗组II及对照组轻。3.创面羟脯氨酸(HOP)含量检测治疗组与对照组创面羟脯氨酸(HOP)含量在创面愈合过程中随时间逐渐增加,各治疗组创面HOP平均含量比对照组创面HOP平均含量增长幅度小,同一时间各治疗组创面HOP含量低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。各治疗组间差异不明显(P>0.05)。结论1.重度烧伤大鼠伤后机体缺乏核黄素,每天予以补充后,能减少重度烧伤大鼠核黄素缺乏的例数,提高血清总抗氧化能力,明显改善大鼠机体核黄素的营养状况。2.创面H-E染色显示,伤后第7天、第14天各治疗组成纤维细胞数及新生表皮层数较对照组少,说明补充核黄素对成纤维细胞有一定抑制作用；且治疗组III炎症反应较轻,说明核黄素补充剂量大于200mg／kg时,具有一定的抗炎作用。3.羟脯氨酸检测结果显示：补充核黄素可降低重度烧伤大鼠创面胶原的沉积,促进创面的愈合。