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临床上，对于大段骨缺损的治疗而言，构建的组织工程骨中心部位常出现血供受限，营养障碍等问题；复杂的骨折常常骨缺损和感染并发。因此，在构建组织工程骨组织的同时，促进小血管长入以及细胞与材料复合物内血供的重建，并控制缺损局部微生物感染成为目前亟待解决的问题。多层载药体系近年来成为研究热点，它不同于普通的单层载药体系，具有载药种类多、突释率低、缓释效果好等优点。其中应用最广泛的为层层自组装技术（LbL)，是基于聚电解质阴阳离子所带正负电荷间相互作用的一种自组装超分子技术。由于其具有简单、快速、高效，制备条件温和、负载药物种类及方式多样、负载量可控、智能响应释放药物等优点，成为目前构建多层药物控释体系的重要方法。本论文主要研究以藻酸盐和壳聚糖为载体，通过层层自组装技术，来制备同时包裹血管内皮细胞生长因子（VEGF）和万古霉素的微球型骨支架材料，用以大段骨缺损的组织工程骨移植，以达到同时具备促进缺损局部血管生成和控制微生物感染的功效，以期在组织工程骨修复骨缺损时在促进骨的愈合与再生中发挥重要作用。目的：本实验探讨包裹有VEGF/VAN的藻酸盐/壳聚糖多层微球制备方法；并对多层微球的大小、形态、成分、包封率、载药量和体外释药进行研究。方法:采用滴注法将海藻酸钠与钙离子交联，形成负载血管内皮生长因子(VEGF)的藻酸钙核心球，然后在核心球的表面利用层层自组装技术依次包覆壳聚糖、海藻酸和壳聚糖，壳聚糖中负载万古霉素(VAN)，形成多药载药缓控体系；采用正交实验设计考察海藻酸钠浓度、钙离子浓度及壳聚糖浓度对两种药物包封率和载药量的影响，优化制备工艺；采用扫描电子显微镜观察多层微球的表面、截面形貌及粒径；采用傅里叶变换红外光谱仪检测海藻酸盐与壳聚糖的自组装情况；分别采用ELISA双抗体夹心法和紫外分光光度法检测VEGF和VAN的包封率、载药量及体外释放情况。结果：正交实验结果表明，海藻酸钠最优浓度为4%、氯化钙最优浓度为15%、壳聚糖最优浓度为1%，此时微球光滑圆整，均质实心，粒径范围500-1000um。红外光谱中出现特征性吸收峰，表明藻酸盐与壳聚糖发生反应，实现多层微球的自组装。最优组微球VEGF的包封率为61.31%，载药量为0.59ug/g；VAN的包封率为3.48%，载药量为12.47mg/g。体外释放试验显示，多层微球中VEGF释放缓慢，缓释时间约21d，累积释放率为93%；万古霉素释放较快，突释现象明显，缓释时间约7d，累积释放率为91%。双重载药多层球兼具控制感染和促进血管生成两种潜能，有望应用于组织工程骨的基础研究和临床实践。结论：载有VEGF/VAN的藻酸盐/壳聚糖多层微球具有较高的包封率，可以实现两种药物的程序性、可控性释放；减少药物的突释现象，延长药物的释放时间。