本论文以法夫酵母(Xanthophyllomyces dendrorhous)为出发菌株,以本研究室发明专利《一种低聚糖-新科斯糖的发酵法生产方法》[公开号CN1873016A]的生产技术,发酵生产低聚糖,对该低聚糖的结构进行分析,并对发酵过程中的酶初步分离,研究其性质。测定发酵液的酶活,其具有一定的糖苷酶活力。对发酵液中糖类物质高效液相色谱分析表明,发酵液中可能存在新科斯糖。以蔗糖为底物,发酵液为酶源进行酶解反应(温度18℃,pH6.5),酶解产物的高效液相色谱分析表明其中蔗糖含量降低,新科斯糖的含量增加,并同时伴随有葡萄糖和果糖的产生,初步说明发酵液中的产糖酶具有果糖基转移作用。采用高效液相NH2制备柱对发酵产物进行纯化制备,收集其中的一种主要的低聚糖,对其进行质谱和13C核磁共振分析,解析两谱图表明,该低聚糖的分子量为504Da,其结构为β-D-呋喃果糖(2→6)-α-D-吡喃葡萄糖(2→1)-β-D-呋喃果糖,即为新科斯糖。采用硫酸铵沉淀,AKTA蛋白纯化层析系统(DEAE Spherose FF层析柱)层析对发酵液中的酶进行初步分离,研究酶学性质。结果表明,该酶分子量约为70542Da,酶解反应的最适温度范围为18~30℃,且该温度范围内酶活稳定,随着温度的升高,酶活力迅速下降,60℃完全失活。其最适pH为6.5,pH 5-6.5范围内,酶活力稳定。研究了部分化学物质对酶活力的影响,其中K+(2mmol/L)对酶活力几乎没有影响,甚至具有激活作用;Ca2+和Mg2+(2 mmol/L)对酶活力影响不大,Zn2+和Al3+(2 mmol/L)对酶活力有抑制作用。2 mmol/L的十二烷基磺酸钠(SDS)和脲对酶活力没有影响,但SDS的浓度增加到10 mmol/L时,对酶活力有较强的抑制作用。