金铁锁的HPLC指纹图谱及特定成分在居群中的分布格局研究

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金铁锁Psammosilenetunicoides是重要的药用植物,为我国西南地区所特有。由于长期以来的过度采集,现已成为濒危物种。为更好的保护和利用该植物,本文从形态性状和化学分子水平,研究它的生物习性和形态特征、化学成分、HPLC指纹图谱以及特定化学成分在居群中的分布格局,得出如下结论:1.金铁锁是我国西南地区所特有的植物。我国分布狭窄,分布于云、贵、川、藏四省区,主产云南西北部和四川西南部,云南省内分布在滇东、滇东北、滇中、滇南、滇西北等地。西藏见于其东部,贵州仅见于西部。金铁锁多生于1500~3800m石灰石冲刷红土滩、石灰岩地、草坡、松林缘、荒地或岩缝中。 2.金铁锁是多年生草本植物,耐干旱,耐贫瘠,喜阳。不同居群物候稍有差别,昆明周边地区3月上旬萌芽,花期4~9月,果熟期7~9月。宣威居群3月下旬萌芽,花期5~8月,果熟期7~9月。丽江和香格里拉居群5月萌芽,花期6~8月,果熟期7~9月。 3.金铁锁的形态变异总体而言,营养器官性状变异程度比生殖器官大。同时,同一性状在不同居群、个体间变异幅度较大。这说明金铁锁对不同的生态环境条件反应较敏感,环境饰变较大。 4.通过对金铁锁正丁醇部分的提取分离,得到一个新的化合物,经结构鉴定为环肽化合物psammosileninsC(-Val-Gly-Ser1-Pro-Ser2-Tyr-His-)。 5.金铁锁HPLC指纹图谱的建立遵循化学指纹图谱的基本要求,经方法学验证稳定可靠,重复性强。对金铁锁的对金铁锁居群或个体进行Q-聚类分析,结果显示丽江象山居群(PD)、丽江阿西居群(PC)、昆明长虫山居群(PG)、昆明团结乡居群(PE)、昆明老五山居群(PB)的部分个体之间的距离较近。安宁笔架山居群(PF)和巧家药山居群在HPLC指纹信息上有较近的亲缘关系,且宣威落水居群(PA)、安宁笔架山居群(PF)和巧家药山居群(PH)中的个体具有较高的相似性。某些个体的聚类没有太强的规律,相互混杂,不易区分,虽然部分居群的一些个体聚在距离上较近,但总体没有规律可言。 6.PsammosileninsC是首次从金铁锁中分离得到的新化合物,是其特有的成分。PsammosileninsC含量在各个居群分布并不均衡,含量最高的是昆明长虫山居群(PG),平均含量达0.9099mg/g,而最高含量的单株也在其中,为昆明长虫山居群(PG)07个体,含量为2.1405mg/g。宣威落水居群(PA)、安宁笔架山居群(PF)和巧家药山居群(PH)中的多数个体不含psammosileninsC,含量最低的是安宁笔架山(PF)居群,所有个体均不含有。就psammosileninsC的绝对含量而言,我们应该关注丽江阿西居群(PC)和丽江象山居群(PD),它们psammosileninsC的含量虽然处于中等水平,但它们的根鲜重较高,平均鲜重分别为22.2982g、20.1570g,这就说明相对含量相同的植株其绝对含量是丽江阿西居群(PC)和丽江象山居群(PD)的为高。软件分析显示psammosileninsC含量有50.2832%的变异存在于居群间,有49.7168%的变异存在于个体间。 7.在金铁锁中psammosileninsC含量与形态性状进行相关性比较中发现,psammosileninsC含量与茎节长呈较强的负相关。同时R-聚类显示psammosileninsC含量与茎节长聚为一类。
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