siRNA干扰B细胞淋巴瘤/白血病-2表达对儿童B-ALL细胞增殖及化疗敏感性的影响

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目的:探讨siRNA干扰B细胞淋巴瘤/白血病-2表达对儿童B-ALL细胞增殖及化疗敏感性影响方法:本研究以初诊36例B-ALL患儿为研究对象,采用RT-PCR技术检测BCL-2mRNA表达;siRNA干扰技术检测BCL-2mRNA高表达患儿的BCL-2mRNA再表达;四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡结果:①儿童B-ALL初诊时bcl-2 mRNA为6.24±0.87,明显高于正常对照组2.85±0.98(t=3.82,p<0.05);高危组bcl-2 mRNA为7.71±0.34,明显高于标危组5.44±0.19(t=2.91,p<0.05)。②耐药组bcl-2 mRNA化疗前表达水平为7.26±0.24,明显高于敏感组5.29±0.49(t=3.07,p<0.05);敏感组bcl-2 mRNA化疗后表达水平为2.97±0.61,较化疗前明显减低(t=4.25,p<0.05);而耐药组bcl-2mRNA表达水平化疗前后无明显改变。③转染bcl-2-siRNA的白血病细胞抑制率为47.56%(A值0.43±0.02),凋亡率为20.42±2.97,均明显高于对照组(t分别为3.85和4.80,p均<0.05)。④bcl-2-siRNA联合柔红霉素组B-ALL患儿白血病细胞凋亡率为31.06±2.30,明显高于单独柔红霉素化疗组和bcl-2-siRNA转染组(t分别为4.87和3.64,p均<0.05)。结论:①初诊儿童B-ALL化疗前bcl-2 mRNA的表达明显高于正常对照组,高危组高于标危组,提示bcl-2参与儿童B-ALL的发生、发展和预后。②耐药组bcl-2mRNA表达明显高于敏感组,提示bcl-2与儿童B-ALL化疗耐药密切相关,bcl-2高表达可能导致白血病细胞化疗耐药,影响药物疗效的重要原因。③bcl-2-siRNA能够抑制儿童B-ALL白血病细胞增殖能力并促进凋亡增加。④bcl-2-siRNA可增加白血病细胞对柔红霉素的化疗敏感性,具有逆转bcl-2高表达导致的耐药性的作用。
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