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背景和目的:白癜风是一种常见的获得性色素脱失性疾病,以表皮内功能性黑素细胞进行性减少或丢失为特点,其机制尚未完全阐明。目前,越来越多的研究表明,氧化应激在白癜风发病中起到至关重要的作用,大量活性氧在黑素细胞内积聚,干扰其正常生理功能,引起黑素细胞的破坏,最终导致局部色素的脱失。a-硫辛酸是目前已知的唯一兼备水溶性和脂溶性的抗氧化剂,与其还原态二氢硫辛酸一起被誉为“万能抗氧化剂”,除了直接清除活性氧和自由基外,a-硫辛酸还可通过增加内源性抗氧化剂的生成提高机体抗氧化能力。近年来,它在糖尿病及其并发症、缺血再灌注、心血管疾病和认知障碍性疾病的预防和治疗中受到广泛关注。已有研究证实,白癜风患者治疗过程中联合应用a-硫辛酸可明显改善白斑复色效果。本研究旨在探讨a-硫辛酸对氧化应激下黑素细胞的保护作用并初步探讨其机制,为临床用药提供实验依据。方法:正常人黑素细胞予以500mM的H2O2处理6h,或400mM的a-硫辛酸预处理12h,再加入500mM的H2O2处理6h。CCK-8检测黑素细胞活性、流式细胞仪分析细胞内活性氧含量、钙离子水平、线粒体膜电位、细胞周期,图像分析软件测量树突回缩速率,透射电镜观察细胞超微结构,Western blotting检测LC3、P62以及mTOR通路相关蛋白表达。结果:H2O2处理后黑素细胞的活力明显降低,a-硫辛酸可保护黑素细胞,促进其增殖,细胞存活率与H2O2组相比差异有统计学意义（0.74±0.08,0.51±0.03,p<0.01）。H2O2处理后细胞内ROS含量（159.43±16.53）和钙离子水平（32.87±2.68）均明显高于对照组（110.43±2.23）和（13.75±1.58）,a-硫辛酸预处理后细胞内ROS（129.88±5.64）和钙离子（20.99±3.13）较H2O2组明显降低,差异有统计学意义（p<0.01,p<0.01）。H2O2可诱导黑素细胞树突出现明显的回缩,与对照组相比,差异有统计学意义（0.39±0.02,0.02±0.01,P<0.01）,a-硫辛酸预处理后树突回缩速率较H2O2组明显减慢（0.18±0.03,0.39±0.02,P<0.01）。a-LA预处理可阻止氧化应激引起的线粒体膜电位下降,与H2O2组相比差异有统计学意义（P<0.05）。电镜可观察到对照组黑素细胞细胞膜结构完整,线粒体数量和形态正常;H2O2组细胞膜完整性破坏,线粒体数量减少,并可见内膜肿胀,嵴减少,甚至空泡化改变;a-LA预处理后,线粒体损伤较H2O2组明显减轻,并可见其他形态正常的细胞器。与对照组相比,氧化应激可使细胞周期阻滞于G2期（P<0.01）,同时减少S期细胞数量（P<0.01）,a-LA预处理可减少阻滞于G2期细胞的数量（P<0.05）,并促进细胞进入S期（P<0.05）。Western blot结果显示H2O2组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值较对照组明显增高（1.19±0.19,0.45±0.10,P<0.01）,经a-LA预处理后细胞自噬水平与H2O2组相比明显降低（0.62±0.10,1.19±0.19,P<0.05）,且a-LA可通过促进mTOR磷酸化,降低氧化应激条件下过度激活的自噬水平,保护黑素细胞。结论:a-LA可明显减轻氧化应激下黑素细胞的损伤,这种保护作用可能是通过清除细胞内的ROS,降低过度激活的自噬水平来实现的。