草鱼(Ctenopharyngodon idellus)促性腺激素及其受体基因的克隆及表达分析

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促性腺激素(Gonadotropin Hormone,GTH)和促性腺激素受体(Gonadotropin receptor,GTHR)对鱼类性腺发育及排卵排精起重要调控作用。本研究克隆了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)GTH两种激素三个亚基的cDNA全长序列和GTHR两种受体的部分序列。采用RT-PCR分析了不同组织中两种GTHβ亚基的表达模式,并通过实时定量PCR技术对不同卵巢发育时期的草鱼GTH表达水平进行了分析。旨在探讨草鱼GTH和GTHR的表达与其生殖发育的关系。获得的主要研究结果如下:1.获得了GTHα,FSHβ及LHβ三个基因的全长序列,为844bp,739bp和576bp,它们分别编码118,130和146个氨基酸。2.获得了草鱼的FSHR及LHR的部分序列。其中FSHR为509bp编码169个氨基酸。LHR获得了两个片段,LHR1为869bp编码289个氨基酸;LHR2为1204bp编码253个氨基酸。3.与其它物种的GTH氨基酸序列比对表明:鱼类中GTH的三个亚基相似性较高,且GTHα较FSHβ和LHβ更为保守。构建的NJ进化树与形态分类学的系统进化相一致。4.RT-PCR证实,草鱼GTH仅在脑垂体中特异性表达。5.实时定量PCR对草鱼卵巢不同时期的FSH和LH分析表明:FSH和LH在草鱼性腺发育早期表达量很低,而在性腺成熟期则同步高表达,且LH的表达量高于FSH。
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