药用甘薯西蒙一号的组织培养、毛状根诱导及其茎叶多糖降血糖作用的研究

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西蒙一号药用甘薯,是巴西联邦国立农科大学郑西蒙教授选育的品种[1,2]。1973年由日本医学博士杨天和引入日本,1982年引进入我国[3]。  西蒙一号是一种十分珍贵的药物植物资源,经多家医院临床实验研究、证明它对治疗血小板减小症、糖尿病及抗肿瘤有较好的疗效,并可增强人体免疫功能[4-8]。  西蒙一号引入我国以来,由于栽培条件的改变,长期无性繁殖病毒危害,造成该品种种性退化严重,其产量逐年下降,给生产上应用和作为保健药物品开发利用带来严重影响。为了在我国综合开发利用甘薯西蒙一号,本文进行了甘薯西蒙一号的组织培养研究,毛状根的诱导,并对甘薯多糖降血糖动物实验进行了初步研究。通过研究得出结果如下:  1.以MS为基本培养基,运用正交设计方法,利用植物组织、细胞培养技术,成功地建立了甘薯西蒙一号的组织培养快繁技术体系。研究出甘薯西蒙一号的最佳快繁培养基为:MS+0.3mg·L-1NAA+0.2mg·L-16-BA+40g·L-1蔗糖;最佳生根培养基为:1/2MS+1.0mg/lNAA。  2.利用发根农杆菌A4分别感染药用甘薯西蒙一号的叶片、茎切段、叶柄等外植体,诱导出毛状根,并对毛状根进行了离体培养。采用L9(34)正交设计法优化甘薯西蒙一号的毛状根诱导条件;PCR扩增检测转化毛状根;HPLC检测毛状根中咖啡酸的含量。结果表明:转化中茎切段是最合适的外植体,最佳感染时间20min,共培养最佳时间为2d;PCR扩增检测表明发根农杆菌 Ri质粒的T-DNA片段已整合进植物的基因组中;HPLC证实毛状根(20天)中含有咖啡酸,含量为:0.03792mg/g。  3.采取水提醇沉法提取甘薯西蒙一号茎叶的多糖;采用四氧嘧啶法诱导小鼠糖尿病模型。将甘薯茎叶多糖分别配置成高、中、低剂量组进行高血糖小鼠的降血糖实验。结果表明:甘薯茎叶多糖高剂量组及中剂量组小鼠的空腹血糖值明显低于模型对照组(p﹤0.01或 p﹤0.05),而低剂量组降血糖作用无明显差异(p﹥0.05)。
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