研究分为药效实验和机制实验两个部分。目的:(一)药效实验比较三个补肾的方剂(左归丸、右归丸和补肾活血方)治疗皮质酮引起的早发性卵巢功能不全的效果。(二)机制实验通过蛋白组学技术研究药效实验中治疗效果最优的补肾方剂在皮质酮诱导的早发性卵巢功能不全治疗中的潜在的分子机制。方法:(一)药效实验50只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、补肾活血方组、左归丸组、右归丸组,每组各10只。皮下注射皮质酮以诱导早发性卵巢功能不全模型。三组治疗组(补肾活血方组、左归丸组、右归丸组)边造模边给药,三周后腹主动脉采血并取脑组织及卵巢组织。采用酶联免疫吸附测定5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺以比较各组应激情况。采用酶联免疫吸附测定雌二醇、卵泡刺激素、抗苗勒氏管激素的浓度以比较各组性激素水平。左侧卵巢用于苏木精-伊红(H&E)染色后显微观察各组卵巢的形态及进行卵泡计数。(二)机制实验50只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、补肾活血方低剂量组、补肾活血方高剂量组,每组各10只。皮下注射皮质酮以诱导应激性早发性卵巢功能不全模型。三组治疗组边造模边给药,三周后腹主动脉采血并取脑组织及卵巢组织。采用酶联免疫吸附测定5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺以评价各组应激情况。采用酶联免疫吸附测定雌二醇、卵泡刺激素、抗苗勒氏管激素的浓度以验证补肾活血方的药效并比较低高剂量的药效。左侧卵巢用于苏木精-伊红染色后显微观察各组卵巢的形态及进行卵泡计数以验证补肾活血方的药效并比较低高剂量的药效。基于蛋白质组学分析用于鉴定差异表达的蛋白质。蛋白质印迹法用于验证蛋白质组学结果。结果:(一)药效实验模型组与空白组相比5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺均显著降低,通过药物干预后有不同程度的改善。模型组与空白组相比雌二醇、抗苗勒氏管激素浓度降低,卵泡刺激素浓度升高;卵巢颗粒细胞排列紊乱,闭锁卵泡增多,其他各级卵泡减少。与模型组相比,补肾活血方组雌二醇及抗苗氏管激素的浓度升高,卵泡刺激素的浓度显著降低,并且窦前及窦状卵泡数显著增加,闭锁卵泡显著减少;左归丸组雌二醇及抗苗氏管激素的浓度升高,卵泡刺激素浓度降低但均无显著性差异,并且闭锁卵泡显著减少;右归丸组雌二醇浓度升高,卵泡刺激素浓度降低,抗苗勒氏管激素浓度显著升高,并且窦状卵泡显著增加,闭锁卵泡显著减少。(二)机制实验空白组、模型组及补肾活血方组,这三组通过蛋白质组学筛选出了7个差异蛋白,其中Np4和Angptl4同时被GO和KEGG富集,因此选择了这两种蛋白进行进一步的验证实验。蛋白印迹法测定出Np4和Angptl4的表达情况与蛋白组学的结果一致。结论:(一)药效实验三种补肾方均能不同程度的改善皮质酮所致的早发性卵巢功能不全,其中补肾活血方的治疗效果最好。(二)机制实验补肾活血方可能是通过调节Np4和Angptl4的表达来改善皮质酮诱导的早发性卵巢功能不全。