【摘 要】
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以体外培养的大鼠脾脏淋巴细胞为实验对象,研究不同浓度去铁酮(1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮,1,2-dimethyl-3-hydroxy-4-pyridone, DFP)对染铝大鼠脾脏淋巴细胞免疫功能的影响
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以体外培养的大鼠脾脏淋巴细胞为实验对象,研究不同浓度去铁酮(1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮,1,2-dimethyl-3-hydroxy-4-pyridone, DFP)对染铝大鼠脾脏淋巴细胞免疫功能的影响。根据IC50的检测结果在培养体系加入终浓度为0.0945mg/mL的A1C13(染铝组,AG组),0.0945mg/mL AICl3+0.189mg/mL DFP(低剂量解毒组,LG组)、0.0945mg/mL AlC13+0.284mg/mL DFP(中剂量解毒组,MG组)、0.0945mg/mL AlC13+0.378mg/mL DFP(高剂量解毒组,HG组),对照组(CG)添加相同体积的RPMI-1640培养液。应用MTT法、二硝基苯肼显色法、放射免疫法、硝酸还原酶法、比色法、硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、钼酸铵显色法、流式细胞术等方法,观测DFP对染铝脾脏淋巴细胞增殖、细胞活性、T淋巴细胞亚群、免疫细胞因子、NO代谢、抗氧化系统、细胞凋亡等的影响,旨在探讨DFP对铝免疫抑制的解毒作用及其机制,为铝毒害的解除提供理论依据。实验结果表明:1铝可抑制T、B淋巴细胞增殖,DFP能缓解铝对T、B淋巴细胞增殖的抑制,其中MG组与AG组差异极显著(P<0.01),说明DFP可抵制染铝对淋巴细胞增殖的抑制作用,MG组效果最好。2与CG组相比,AG组淋巴细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率增加(P<0.01),而DFP可降低染铝后LDH的漏出率,其中MG组与AG组差异极显著(P<0.01),说明DFP可缓解染铝所致的淋巴细胞膜损伤,MG组效果最好。3AG组大鼠脾脏淋巴细胞培养上清液中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量均显著低于CG组(P<0.01),而LG组、MG组和HG组均高于AG组(P<0.05;P<0.01),表明DFP可恢复染铝所致的细胞因子分泌抑制。4LG组、MG组、HG组CD3+阳性率、CD4+阳性率、CD4+/CD8+比值均高于AG组,CD8+阳性率低于AG组,其中MG组与AG组差异极显著(P<0.01),表明DFP可恢复染铝所致的大鼠T淋巴细胞免疫功能抑制,MG组恢复作用最好。5LG组、MG组、HG组大鼠脾脏淋巴细胞内一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量低于AG组,超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性高于AG组,其中MG组与AG组差异极显著(P<0.01),提示DFP可减轻铝引发的大鼠脾脏淋巴细胞氧化胁迫,MG组效果最明显。6与AG组相比,MG组大鼠脾脏淋巴细胞早期凋亡指数和总凋亡指数显著减少(P<0.01),而与CG组差异不显著,表明该剂量的DFP可有效缓解铝诱导的大鼠脾脏淋巴细胞凋亡。
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