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目的:探讨雷帕霉素联合紫杉醇对子宫内膜癌Ishikawa细胞的生长抑制、凋亡及对HIF-1α、VEGF蛋白表达的影响,分析mTOR信号通路在肿瘤中的调控机制,为临床上治疗子宫内膜癌提供基础及依据。方法:1.细胞培养:将子宫内膜癌Ishikawa细胞置于培养箱中培养,观察细胞的生长情况,备实验应用。2.选择不同浓度的雷帕霉素及紫杉醇对子宫内膜癌Ishikawa细胞进行研究。采用雷帕霉素单独或联合紫杉醇处理细胞作为实验组,其中不加任何的药物作为空白对照组。3.应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测子宫内膜癌Ishikawa细胞的生长抑制作用。4.流式细胞术分析检测子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡率的变化。5.免疫细胞化学检测子宫内膜癌Ishikawa细胞中的HIF-1α、VEGF蛋白表达情况。6.采用SPSS17.0分析软件,统计学分析采用LSD-t检验和方差分析。结果:1.MTT方法:不同浓度的雷帕霉素(1、10、20μmol/L)、紫杉醇0.36μmol/L、紫杉醇0.36μmol/L联合雷帕霉素10μmol/L,对体外培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞有增殖抑制作用,随着药物浓度的增加、时间的延长雷帕霉素对子宫内膜癌Ishikawa细胞的生长抑制率呈现上升趋势,各实验组之间进行比较有统计学差异(P<0.01)。2.FCM法分析检测:不同浓度的雷帕霉素能够促进子宫内膜癌Ishikawa细胞的凋亡,且以剂量依赖方式诱导细胞凋亡(P<0.05)。3.S-p检测:雷帕霉素单独及联合紫杉醇处理子宫内膜癌Ishikawa细胞,发现实验中的各组子宫内膜癌细胞中HIF-1α、VEGF有不同程度的表达,随着雷帕霉素药物浓度的增加两蛋白表达水平反而下降,且两种蛋白的阳性表达呈正相关(P<0.01)。结论:1.雷帕霉素单独及联合紫杉醇能够抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖活性,且联合情况下抑制作用更明显。2.雷帕霉素能够促进子宫内膜癌Ishikawa细胞的凋亡。3.雷帕霉素单独及联合紫杉醇能够下调子宫内膜癌Ishikawa细胞HIF-1α、VEGF蛋白的表达。4.本实验进一步证实了mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素具有抑制体外子宫内膜癌的作用,通过抑制肿瘤血管的形成来控制肿瘤的生长,为子宫内膜癌的靶向治疗提供新思路、新方法。