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目的通过对乙型肝炎病毒疫苗接种后不同免疫应答人群T细胞亚群、T调节细胞、外周血单个核细胞在PHA和HBsAg干预前后Foxp3 mRNA的表达和细胞因子分泌情况的检测,探讨乙型肝炎病毒疫苗接种后免疫应答与T细胞亚群活化、免疫调节细胞和细胞因子之间的内在联系。方法对1024名大专生乙型肝炎病毒血清学标志物进行初筛,选取其中无任何血清学标志物的个体进行常规重组酵母乙型肝炎病毒疫苗接种,全程接种完后45日行HBV血清学检查。选取其中18例乙型肝炎病毒疫苗接种后HBsAb阳性者作为应答组,22例乙型肝炎病毒疫苗接种HBsAb阴性者作为无应答组,10例未接受乙型肝炎病毒疫苗接种的健康对照者作为对照组。采集不同反应人群全血,用流式细胞术对其外周血单核细胞的表面标志物：CD69、CD4、CD8、CD25等进行检测,计算不同T细胞亚群百分比,如CD69+、CD4+、CD8+T细胞百分比及CD4+CD25+Treg细胞数；实时荧光定量PCR检测人外周血单个核细胞在PHA和HBsAg刺激前后Foxp3 mRNA的表达；酶联免疫吸附实验检测不同反应人群外周血单个核细胞PHA和HBsAg刺激后IL-4、IL-12、IL-18、IFN-γ的分泌情况。结果1.通过酶联免疫吸附法检测2006级大专生1024人,其中血清无任何标志物的有405人,乙型肝炎病毒携带率为1.7%。全程接种乙型肝炎病毒疫苗后乙肝血清学显示：男、女生无、弱应答率之间无显著性差异；约65%免疫应答个体的乙肝表面抗体滴度属于高反应组。2.应答组、无应答组、对照组CD4+CD69+T细胞占CD4+T细胞的百分比分别为1.81±1.33%、0.64±0.48%、和0.56±0.39%,应答组CD4+T细胞中CD69的表达明显高于对照组(p7<0.01),也明显高于无应答组。但无应答组与对照组间差异无显著性意义(p>0.05)。各组CD8+CD69+T细胞占CD8+T细胞的百分比分别为0.43±0.25%、3.05±1.69%、和3.11±2.41%,应答组与对照组和无应答组比较,差异均有非常显著性意义p<0.01)。3.应答组、无应答组、对照组CD3+CD4+T细胞占CD3+T细胞的百分比分别为50.84±6.36%、53.67±6.68%和51.02±9.30%,各组结果比较,差异没有显著性意义(p>0.05)；各组CD3+CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比分别为41.02±4.41%、42.69±7.35%、和42.36±8.34%,统计学分析,组间结果的差异无显著性意义p>0.05)。4.应答组、无应答组、对照组CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比分别为0.59±0.46%、0.77±0.40%、和1.30±1.44%,统计学分析,组间结果的差异无显著性意义(p>0.05)。5.实时荧光定量PCR检测应答组、无应答组、对照组外周血单个核细胞Foxp3的表达。PHA和HBsAg刺激前,Foxp3的表达在应答组和无应答组、对照组相比,其差异有显著性意义(p<0.05)。在PHA和HBsAg刺激后应答组和无应答组相比,p=0.111(p>0.05),两者之间没有显著性差异；应答组与对照组相比,两者之间存在显著性差异(p<0.05)。6.应答组、无应答组、对照组外周血单个核细胞经PHA和HBsAg刺激后应答组与无应答组、应答组与对照组IFN-γ的浓度相比较,其差异均有统计学意义(p<0.05)；应答组与无应答组,应答组与对照组IL-18、IL-4、IL-12的浓度相比较,其差异均无统计学意义(p>0.05)。结论1.20μg每次全程乙型肝炎病毒疫苗接种后无应答率为5.5%,在应答人群中,弱应答率为13%,中应答率为22%,强应答率为65%。2.乙型肝炎病毒疫苗接种后无应答与Th细胞早期活化不足、Ts细胞活化增加有关。3. CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在一定程度上参与了乙肝疫苗接种应答的负性调控。4.乙型肝炎病毒疫苗接种后无应答与IFN-γ分泌不足有关。