红霉素高效降解菌的筛选及降解性能研究

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抗生素类药品是目前应用最为广泛的药物之一,在其生产过程中所产生的废水具有COD浓度高、盐浓度高、色度及味度大、难于生化降解等特点,抗生素废水的处理是目前环境工作者们研究的热点。而抗生素废水生物处理工艺的核心是驯化和筛选能够耐受并分解废水所含抗生素和其它有机污染物的高效降解微生物。本课题对东北制药厂曝气池活性污泥进行厌氧驯化,筛选出三株对红霉素具有高抗药性和降解性菌株,分别命名为JA-1、JA-2和JA-3,对其生理生化特性、生长条件、降解性能、耐药机理等进行了系统研究和优化。通过菌株形态特征及生理生化实验研究,初步鉴定得到JA-1为克雷伯氏菌属(Klebsiella. sp), JA-2为氨基酸球菌属(Acidminococcus. sp), JA-3为变形菌属(Protens.sp)。通过对其最佳生长条件的研究得到:JA-1的最佳生长时间为24h,JA-2的最佳生长时间为49h,JA-3的最佳生长时间为28h;JA-1、JA-2和JA-3的最佳碳源为葡萄糖;JA-1的最佳氮源为硫酸铵,JA-2和JA-3的最佳氮源为酵母膏;三株菌株可适应pH为6-9的环境;最适生长温度在26~40℃区间。三株菌株耐盐性都很强,其中JA-3最大耐盐度可达50g/L。而菌株的耐药性试验显示,JA-l对红霉素的耐药性不高,只有在红霉素浓度小于2g/L时正常生长;JA-2和JA-3对红霉素的耐药性较高,在红霉素浓度达到8g/L左右时仍然生长很好,当红霉素浓度大于10g/L以后,菌株停止生长。采用硫酸显色分光光度法和快速消解分光光度法检测三株菌株对红霉素的降解作用。通过改变碳氮源、初始pH值、接种量、培养温度、培养时间、红霉素浓度等条件,确定了菌株的最佳降解条件:将JA-1按8%的接种量接种于pH值为7的红霉素模拟废水中,在35℃下厌氧培养56h后,JA-1对红霉素降解率及COD的去除率最高,分别为64.2%和58.9%;将JA-2按8%的接种量接种于pH值为8的模拟废水中,在35℃下厌氧培养80h后,JA-2对红霉素降解率及COD的去除率最高,分别为72.0%和66.2%;将JA-3按8%的接种量接种于pH值为8的模拟废水中,在35℃下厌氧培养56h后,JA-3对红霉素降解率及COD的去除率最高,分别为71.2%和52.1%。同时,通过对复合菌群处理效果的实验研究可知,虽然复合菌群对红霉素的降解率和单一菌群相似,但是对COD的降解率要高于单一菌群。这是因为不同组合的复合菌群之间存在互生、共生和协同作用,菌种互相依赖形成特殊的分解链。其中JA-1+JA-2和JA-1+JA-3组合对COD的降解率最高,分别为68.1%和67.1%。研究红霉素浓度对菌株降解性能的影响得到,随着红霉素浓度的增加,JA-1、JA-2、JA-3对红霉素和COD的降解率不断降低,且红霉素浓度对COD去除率影响很大。最后通过菌株对红霉素的耐药机理的初步分析可知,红霉素对微生物进行诱导,引起微生物染色体基因的变异从而形成了微生物的耐药或耐毒物性,这为利用微生物处理红霉素废水提供了可行性,并非常有实际意义。
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