大豆根瘤菌与大豆品种共生匹配性研究

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本文采用营养液水培法测定了不同来源的快生、慢生大豆根瘤菌与我国主要的大豆核心种质品种的共生结瘤固氮匹配组合,对在大豆品种绥农20表现匹配性显著差异的两株慢生大豆根瘤菌USDA110-A和2178进行了蛋白质组学初步分析,以探寻其共生匹配性差异的原因。本研究将为根瘤菌剂选用和大豆种质育种材料选择提供依据,实现共生体系高效共生固氮的目的。论文结果如下:18株大豆根瘤菌和11个大豆品种进行结瘤匹配试验结果表明,不同的大豆根瘤菌菌株间结瘤固氮差异显著,快生大豆根瘤菌表现出比慢生大豆根瘤更严格的品种匹配性;菌株USDA110、USDA110-A、113-2、HH103具有较为广谱的共生结瘤特性;匹配性强的大豆品种有北京黑豆、商951099、郑92116。匹配组合中发现在与品种绥农20组合中,菌株USDA110-A与绥农20共生结瘤良好,而2178却不与该品种结瘤;这两个组合是研究根瘤菌与其寄主共生结瘤的机理的理想材料。菌株USDA110-A、2178经绥农20大豆苷元处理后,其蛋白质组表达分析表明,USDA110-A有8个蛋白点发生上调,7个蛋白点发生下调;2178有5个蛋白点发生上调,7个蛋白点发生下调。进一步用MOLDI-TOF质谱鉴定的差异表达蛋白,除了蛋白点USDA110-A的12号蛋白,2178的1、3、5、11、18号蛋白外,其它20个蛋白点得到成功的鉴定,基本确定了14个蛋白质的功能,其余6个为未知功能的蛋白质。在本研究鉴定的USDA110-A表达的上调蛋白中,DHDPS合成酶、磷酸化酶、糖基转移酶等至少3个蛋白与共生结瘤相关,并通过参与EPS的合成起作用;ABC类型的有机可溶物转运子(ABC-type organic solvent transporter)是跨膜的转运蛋白,它通过上调表达改变结瘤因子的结构,增加结瘤因子向胞外分泌,提高根瘤菌的亲和匹配性。但在2178中未检测到以上与EPS合成相关蛋白的差异表达,也未检测到其它与结瘤共生相关的蛋白。根瘤菌菌株对大豆苷元引起响应的不同结果,是产生其与品种共生匹配性差异的原因之一。
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