【摘 要】
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目的探讨基于乙肝病毒核心蛋白（HBc）的改造位点及形式，使形成携带细胞穿膜肽或配体的核心颗粒，以作为HBV感染模型改造的基础。方法1用不依赖酶切连接的分子克隆方法（RLIC）构建HBc、
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目的探讨基于乙肝病毒核心蛋白（HBc）的改造位点及形式，使形成携带细胞穿膜肽或配体的核心颗粒，以作为HBV感染模型改造的基础。方法1用不依赖酶切连接的分子克隆方法（RLIC）构建HBc、HBV1.1c-及各种HBc改造质粒。2将各种HBc重组体与HBV1.1c-共转染HEK293细胞，通过提取细胞内核心颗粒DNA，Southern blot检测DNA中间体，来判断相应基因工程改造HBc是否支持HBV复制，形成包裹核酸的核心颗粒。结果1成功构建在HEK293细胞内有效支持HBV复制的WtHBc与HBV1.1c-反式互补系统；2HBc部位aa79-80缺失支持HBV制；3HBc aa86-93缺失后功能缺；4HBc N末插入肽后能较水平支持HBV制；5HBc N末可为普有效位点，用A/B/C接连接，可支持片EGFP（238aa）RFP（225aa）、VSVG（511aa）。结论我们构建了有效HBc与HBV1.1c-反式互补统，统可检造HBc是否具有包裹核酸形成核心颗粒类病毒（VLPs）的功能。利用该系统，我们检测到HBc aa79-80及aa86-93缺失或替换后均存在功能缺陷，这些序列可能与HBc的完整结构及功能有关。N末端可作为有效的改造位点，支持各种长度的外源蛋白融合，可长达511aa。
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