干扰素α-1b雾化吸入治疗呼吸道合胞病毒感染的实验研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongshu16
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目的:  呼吸道合胞病毒(RSV)是全球婴幼儿下呼吸道感染的首位病毒病原体,儿童2岁前都至少感染过一次RSV,多数会发生再感染,与日后发生喘息密切相关,它是严重危害婴幼儿健康的一种病毒。重组人干扰素α-1b是我国第一个自主开发的基因工程新药,据研究报告称,与国内外同类产品相比,重组人干扰素α-1b在抗病毒治疗中不仅疗效高,而且不良反应轻,中和抗体产生率低,是适合中国人使用的基因工程药物。已有实验表明重组人干扰素α-1b作为一种较为安全和不产生耐药性的广谱抗病毒制剂,在RSV感染治疗中有巨大的优势。但到目前为止,国内应用重组人干扰素α-1b治疗RSV感染,多选肌肉注射给药,儿童依从性较差,且会引起发热、肌肉酸痛等不良反应,也有关于雾化吸入此药治疗呼吸道病毒感染的临床报告,但在雾化吸入干扰素α-1b治疗RSV感染方面缺乏相关实验室依据。为此,我们建立了RSV感染的小鼠模型,观察改变给药途径后(即经雾化吸入干扰素α-1b)其在小鼠体内对RSV的抑制作用,通过与雾化吸入利巴韦林的疗效比较,探讨雾化吸入干扰素α-1b治疗呼吸道合胞病毒感染的有效性,为今后的临床试验提供理论依据。  方法:  将40只BALB/c小鼠滴鼻感染RSV,制备成RSV感染模型后随机分为4组:生理盐水对照组;干扰素α-1b治疗组;利巴韦林治疗组;干扰素α-1b+利巴韦林治疗组。分别雾化吸入生理盐水、干扰素α-1b、利巴韦林、干扰素α-1b+利巴韦林。第5天各组中随机抽取5只小鼠处死,取左肺组织处理后用于光镜观察肺组织病理改变,并计算病理积分(PS),将右肺组织处理后用于透射电镜观察;各组中其它5只小鼠处死后无菌分离气管,用生理盐水进行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),使用血球计数仪计数白细胞总数,离心处理沉淀物涂片后,按淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞形态学特点分类计数,上清液用于RSV实时荧光定量逆转录PCR的测定。  结果:  1.病理学检查光镜形态学观察:三个治疗组小鼠肺病理变化较对照组明显减轻,且干扰素α-1b治疗组较利巴韦林治疗组病变更轻;经统计学处理光镜PS结果:三个治疗组较对照组显著减少,治疗组间无差异;电镜下观察:三个治疗组病理变化较对照组明显减轻。  2.细胞学检查:三个治疗组BALF白细胞计数及淋巴细胞比例显著低于对照组(P<0.05),干扰素α-1b治疗组和干扰素α-1b+利巴韦林治疗组无显著差异,两组均显著低于利巴韦林治疗组;各组BALF白细胞分类都以淋巴细胞为主。  3.支气管肺泡灌洗液RSV实时荧光定量逆转录PCR的测定结果:三个治疗组显著低于生理盐水对照组(P<0.05),干扰素α-1b治疗组及干扰素α-1b+利巴韦林治疗组无显著差异,两组均显著低于利巴韦林治疗组。  结论:  本实验光镜形态学显示单用雾化吸入干扰素α-1b能明显减轻小鼠RSV肺炎的病理改变,效果同干扰素α-1b+利巴韦林,但优于单用利巴韦林;光镜病理积分显示雾化吸入干扰素α-1b、雾化吸入干扰素α-1b+利巴韦林及雾化吸入利巴韦林能显著减轻肺部病理改变,三种方法效果相同;电镜显示雾化吸入干扰素α-1b、雾化吸入干扰素α-1b+利巴韦林及雾化吸入利巴韦林能减轻小鼠肺病理改变,三种方法效果相同;BALF细胞学检查显示雾化吸入干扰素α-1b、雾化吸入干扰素α-1b+利巴韦林均可明显减少气道炎症细胞,两种方法效果相同,但显著优于单用利巴韦林;支气管肺泡灌洗液RSV实时荧光定量逆转录PCR测定结果也显示雾化吸入干扰素α-1b、雾化吸入干扰素α-1b+利巴韦林均能有效降低病毒的拷贝数,两种方法效果相同,但明显优于单独雾化吸入利巴韦林。因此单独雾化吸入干扰素α-1b与干扰素α-1b+利巴韦林合用治疗呼吸道合胞病毒感染的效果相同,但明显优于单独雾化吸入利巴韦林。故单独雾化吸入干扰素α-1b是治疗RSV感染的有效方法。
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