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第一章Hsa-miR-181a-5p在卵巢癌组织中的表达及其与临床分期、病理分级的关系研究目的：探讨hsa-miR-181a-5p在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法：用RT-qPCR技术检测16例卵巢上皮性癌组织、8例卵巢良性上皮性肿瘤和6例卵巢正常上皮组织标本中hsa-miR-181a-5p表达情况,并研究其与卵巢癌临床分期、病理分级之间的关系。结果：卵巢癌组的hsa-miR-181a-5p平均相对表达量为9.67±4.78,显著低于正常对照组的18.76±5.29,差异有统计学意义,P<0.01；也显著低于卵巢良性肿瘤组的15.45±4.46,差异也有统计学意义,P<0.05；而卵巢良性肿瘤组的hsa-miR-181a-5p平均相对表达水平略低于正常对照组,差异无统计学意义,P>0.05。16例卵巢癌组织标本中,浆液性囊腺癌组、黏液性囊腺癌组和子宫内膜样癌组的hsa-miR-181a-5p相对表达量分别为8.21±3.56、9.78±4.85和9.88±1.24,三组之间均无显著性差异,P>0.05；Ⅲ-Ⅳ期组的hsa-miR-181a-5p相对表达量为8.77±4.56,低于Ⅰ-Ⅱ期组的10.89±3.16,差异也无显著性,P>0.05；低分化组的hsa-miR-181a-5p相对表达量为5.54±2.35,显著低于高分化组的12.78±2.15,差异有统计学意义,P<0.05；也低于中分化组的9.23±3.67,但差异无统计学意义,P>0.05；中分化组的hsa-miR-181a-5p相对表达量低于高分化组,差异无统计学意义,P>0.05。结论：1.Hsa-miR-181a-5p在卵巢癌组织的表达是下调的,说明其可能在卵巢癌发生发展过程中扮演抑癌基因的角色。2.Hsa-miR-181a-5p在卵巢癌组织中的表达水平可能与组织学分化程度相关,即组织学分化程度越低,其表达水平越低；而与病理组织学类型和临床分期不相关。第二章Hsa-miR-181a-5p对卵巢癌OVCAR3细胞株生物学功能影响目的：探讨hsa-miR-181a-5p对卵巢癌OVCAR3细胞株生物学功能的影响,包括增殖、凋亡侵袭能力和Bcl-2蛋白的表达。方法：将卵巢癌OVCAR3细胞株的细胞分为3组,即实验组、阴性对照组和空白对照组。实验组和阴性对照组使用LipofectamineTM2000分别转染hsa-miR-181a-5p激动剂、混杂RNA,空白对照组加相应量不含任何RNA和脂质体的无血清培养基；每组设3个平行样品。分别采用RT-qPCR、MTT法、PI单染法、AnnexinV/PI双染法、Transwell小室侵袭实验和VWestern blotting法检测各组细胞hsa-miR-181a-5p的表达水平、增殖、周期、凋亡、侵袭能力和Bcl-2蛋白的表达水平。结果：转染24、72、120小时后,hsa-miR-181a-5p在实验组的相对表达含量分别为25.56±3.48、21.23±2.53、17.46±2.49,均显著高于阴性对照组的14.27±3.11、14.56±2.89、13.82±2.53和空白对照组的13.25±2.78、12.31±2.35、11.62±2.68,差异均有统计学意义,P<0.01或0.05；转染48、72小时后,实验组的细胞OD值分别为0.410±0.031、0.439±0.031,均显著低于阴性对照组的0.600±0.015、0.724±0.024,P<0.05或0.01；转染72小时后,实验组的平均G0/G1期百分比为58.1±2.46%,显著高于阴性对照组的37.0±1.60%和空白对照组的36.2±1.75%,差异具有统计学意义,P<0.01；转染72小时后,实验组的平均凋亡率为23.33±2.08%,显著高于阴性对照组的11.00±2.64%和空白对照组的8.33±2.51%,差异有统计学意义,P<0.05；转染72小时后,实验组的平均侵袭细胞数为21.33±3.05,显著低于阴性对照组的38.33±2.08和空白对照组的41.00±2.64,差异有统计学意义,P<0.01；转染72小时后,实验组的平均Bcl-2蛋白相对表达水平为0.282±0.031,显著低于阴性对照组的0.642±0.106和空白对照组的0.635±0.078,差异有统计学意义,P<0.01。结论：1.Hsa-miR-181a-5p agomir能有效转染OVCAR3细胞株,而且其持续有效作用时间在120小时以上,可能成为未来治疗卵巢癌的基因药物之一2.Hsa-miR-181a-5p能抑制OVCAR3细胞株的增殖和侵袭转移能力,并促进其凋亡,其机制可能与调控细胞周期和靶标Bcl-2蛋白表达下降有关。